談乳絡(luò )通膠囊的鎮痛抗炎及改善微循環(huán)作用的論文
中醫認為乳腺增生主要為肝郁氣滯,痰瘀瘟結于經(jīng)絡(luò ),從而形成" 乳癖" ,相當于現代醫學(xué)的乳房纖維性瘤,乳腺囊性,臨床癥狀主要為乳房出現腫塊,疼痛等。乳絡(luò )通主要有香附、丹參、柴胡、白芍、栝樓、路路通6 味藥組成,本文采用急慢性炎癥動(dòng)物模型和疼痛模型評價(jià)了乳絡(luò )通的抗炎、鎮痛及改善微循環(huán)作用,旨在為其治療乳腺增生提供藥效學(xué)依據。
1 材料和方法
1. 1 試驗藥物乳絡(luò )通膠囊( 乳絡(luò )通) ,由河南中醫學(xué)院第一附屬醫院制劑室提供,批號050901,規格: 0. 2g /粒,用量: 每次3~ 4 粒,每天3 次。乳康片,由安康正大制藥有限公司提供,批號: 20050518,規格: 0. 35g × 24 片,用量: 一次3 片,一日3 次。
1. 2 動(dòng)物大鼠,Wistar,雌性,清潔級,由河南省實(shí)驗動(dòng)物中心提供,合格證號: 0001640。小鼠,昆明種,雌性,清潔級,由河北省實(shí)驗動(dòng)物中心提供,合格證號: DK0509096。
1. 3 試劑硫化鈉,由天津市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心提供,批號: 2003021-16,規格: 500g。
1. 4 儀器BZ-2000 微循環(huán)觀(guān)察系統,由成都泰盟電子有限公司提供。FA( N) /JA( N) 系列電子天平,由上海民橋精密儀器有限公司提供。YLS-6A 智能熱板儀,由山東省醫學(xué)科學(xué)院設備站提供。
1. 5 方法
1. 5. 1 乳絡(luò )通對熱板法致痛小鼠的影響取18 ~ 20g 的清潔級昆明種雌性小鼠,用智能熱板儀( 56℃) 測定它們的初始痛閾值,以小鼠舔后足跖為痛閾出現的指標,進(jìn)行小鼠篩選標記。再取痛閾值在5 ~ 20S 的合格小鼠50 只,隨機分為5 組。分別灌胃高、中、低劑量的乳絡(luò )通混懸液( 0. 60g /kg、0. 30g /kg、0. 15g /kg) 、乳康片混懸液( 0. 53g /kg) ,及同體積的生理鹽水。每天灌胃1 次,連續灌胃3 天,于最后一次灌胃30min 后,在同樣環(huán)境中分別測定它們30min, 60min, 90min, 120min 的痛閾值。
1. 5. 2 乳絡(luò )通對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響取20 ~ 22g的清潔級昆明種雌性小鼠50 只,隨機分為5 組,分別灌胃乳康片( 0. 53g /kg) ,乳絡(luò )通高、中、低( 0. 60g /kg、0. 30g /kg、0. 15g /kg) 劑量和同體積的生理鹽水。每天灌胃1 次,連續給藥3 天,于最后一次灌藥1h 后,每鼠左耳滴二甲苯0. 04ml( 正反均滴) ,右耳作為對照,滴加二甲苯1h 后處死動(dòng)物,取下雙耳,對齊,用0. 8cm 的打孔器打下雙耳耳片。迅速在分析天平上稱(chēng)重,測腫脹度( 左耳與右耳的質(zhì)量差) 。
1. 5. 3 乳絡(luò )通對大鼠棉球肉芽腫的影響取130 ~ 150g 清潔級Wistar 雌性大鼠50 只,隨機分為乳絡(luò )通高、中、低劑量( 0.60g /kg、0. 30g /kg、0. 15g /kg) 組,乳康片組( 0. 53g /kg) 和空白對照組( 灌同體積的生理鹽水) 。實(shí)驗前禁食不禁水10h。取脫脂棉( 20 ± 0. 5 mg) 60 個(gè),分別稱(chēng)重,放入高壓滅菌鍋內滅菌1h,90℃烘箱干燥3h。干燥后再次稱(chēng)重并記錄重量,放入干燥器內備用。麻醉大鼠,在無(wú)菌操作下埋入后大腿內側腋窩皮下。每天灌胃1 次,連續灌胃7 天,最后一次給藥1h 后,處死動(dòng)物,剝離棉球肉芽腫。取出后60℃ 烘干24h,稱(chēng)重,計算肉芽腫的重量。
1. 5. 4 乳絡(luò )通對小鼠耳廓微循環(huán)的影響取18 ~ 22g 的清潔級昆明種雌性小鼠50 只,隨機分為乳絡(luò )通高、中、低組( 0. 60g /kg、0. 30g /kg、0. 15g /kg) ,乳康片組( 0. 53g /kg) 和空白對照組( 灌同體積的生理鹽水) 。每天灌胃給藥1 次,連續灌胃5 天。實(shí)驗前每鼠右耳用8% 硫化鈉脫毛,再用溫水洗凈, 24h 后進(jìn)行實(shí)驗。末次給藥30min 后,水合氯醛( 3% 0. 15m1 /10g) 腹腔注射麻醉。將小鼠固定在觀(guān)察臺上( 耳托上和耳廓表面滴加少許液體石蠟) ,用BZ-2000 型微循環(huán)顯微鏡和微循環(huán)測量分析系統觀(guān)察小鼠耳廓微循環(huán)情況。用微量注射器腹腔注射用生理鹽水稀釋( 1: 9) 的鹽酸腎上腺素注射液( 0. 6mg /kg) ,記錄注射前和注射后5、10、20min 小鼠微循環(huán)細靜脈、細動(dòng)脈的管徑和血流速度變化情況。
2 結果
2. 1 乳絡(luò )通對熱板法致痛小鼠的影響知: 30min 時(shí),乳康片組、高、中、低劑量乳絡(luò )通組的小鼠痛閾值提高較大,與空白對照組比較差別明顯。60min時(shí),乳康片組、高、中、低劑量乳絡(luò )通組的小鼠痛閾提高值較大,與空白對照組比較差別顯著(zhù)。90min 時(shí),乳康片組、高、中、低劑量乳絡(luò )通組的小鼠痛閾值提高較大,與空白對照組比較差別顯著(zhù)。120min 時(shí),高、中劑量乳絡(luò )通組的小鼠痛閾值提高較大,與空白對照組比較差別明顯。
2. 2 乳絡(luò )通對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響由表2 可知: 乳康片組,高、中劑量乳絡(luò )通組對小鼠耳廓腫脹有顯著(zhù)地抑制作用,低劑量乳絡(luò )通組對小鼠耳廓腫脹有明顯地抑制作用,與空白組比較,有明顯差異。
2. 3 乳絡(luò )通對大鼠棉球肉芽腫的影響由表3 可知: 乳康片、高、中劑量乳絡(luò )通組對大鼠棉球肉芽腫有顯著(zhù)的抑制作用,低劑量乳絡(luò )通組對大鼠棉球肉芽腫有明顯地抑制作用,與空白對照組比較,有明顯差異。
2. 4 乳絡(luò )通對小鼠耳廓微循環(huán)的影響從表4 可知: 在5min 時(shí),高、中劑量乳絡(luò )通組的小鼠耳廓微循環(huán)細靜脈管徑收縮較小,與空白對照組比較,差別明顯。而乳康片組和低劑量乳絡(luò )通組的小鼠耳廓微循環(huán)細靜脈管徑收縮較大,與空白對照組比較,無(wú)顯著(zhù)差別。在10min 時(shí),乳康片組、高、中劑量乳絡(luò )通組的小鼠耳廓微循環(huán)細靜脈管徑收縮較小,與空白對照組比較差別顯著(zhù); 而低劑量乳絡(luò )通組的小鼠耳廓微循環(huán)細靜脈管徑收縮明顯,與空白對照組比較無(wú)顯著(zhù)差別。在20min 時(shí),乳康片組、高、中劑量乳絡(luò )通組的耳廓微循環(huán)細靜脈管徑收縮較小,與空白對照組比較差別顯著(zhù)( P < 0. 01) ; 而低劑量乳絡(luò )通組的小鼠耳廓微循環(huán)細靜脈管徑收縮明顯,與空白對照組比較無(wú)顯著(zhù)性差別。從表5 可知: 5min 時(shí),各組小鼠耳廓微循環(huán)細動(dòng)脈管徑稍有收縮,無(wú)差異。在10min 時(shí),乳康片組、高、中、低劑量乳絡(luò )通組的小鼠耳廓微循環(huán)細動(dòng)脈管徑收縮較小,與空白對照組比較差別顯著(zhù)。在20min 時(shí),乳康片組、高、中、低劑量乳絡(luò )通組的'小鼠耳廓微循環(huán)細動(dòng)脈管徑收縮較小,與空白對照組比較差別顯著(zhù)。
與空白組比較,在5min 時(shí),各組小鼠耳廓微循環(huán)血流速度有所減小,但無(wú)差別。在10min 時(shí),乳康片組、高、中劑量乳絡(luò )通組的小鼠耳廓微循環(huán)血流速度減少值較小,與空白對照比較,差別顯著(zhù)。在20min 時(shí),乳康片組、高、中、低劑量乳絡(luò )通組的小鼠耳廓微循環(huán)血流速度減少值較小,與空白對照組比較,差別顯著(zhù)。
3 討論
乳腺增生病是嚴重危害女性健康的一種常見(jiàn)疾病、多發(fā)病。中醫認為該病主要由情志不暢,思慮過(guò)度,導致肝失舒泄,氣機不暢,氣滯血瘀,或肝脾不和,痰氣凝滯而成,F代醫學(xué)認為乳腺增生是由性激素代謝紊亂,卵巢內分泌功能失調,雌激素相對或絕對過(guò)高而引起,其臨床特征為乳房脹痛、乳房腫塊,一般常于月經(jīng)前期加重,行經(jīng)后減輕。對于該病的治療,中醫治療原則是以疏肝解郁,理氣止痛,軟堅散結為主。
乳絡(luò )通主要有香附、丹參、柴胡、白芍、栝樓、路路通六味藥組成,具有理氣化淤、軟堅散結、消腫止痛的功效,在前期的研究中,我們復制了大、小鼠乳腺增生模型,觀(guān)察了其對乳腺增生的治療作用及其作用機制。為了更進(jìn)一步驗證該藥的藥效,我們觀(guān)察其活血散瘀,消腫止痛的作用。
在本實(shí)驗中,我們采用熱板法、二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、大鼠棉球肉芽腫法及小鼠耳廓微循環(huán)法來(lái)觀(guān)察乳絡(luò )通的鎮痛、抗炎及改善微循環(huán)的作用。結果顯示乳絡(luò )通能提高小鼠痛閾值,減輕耳廓腫脹的程度,使大鼠棉球肉芽腫的重量減小,能對抗腎上腺素引起的微血管收縮,能擴張小鼠耳廓微動(dòng)脈、微靜脈管徑,改善血液流態(tài)。通過(guò)本實(shí)驗的研究,乳絡(luò )通具有一定的鎮痛和抗炎作用。
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