【經(jīng)典】生物實(shí)驗報告17篇
隨著(zhù)個(gè)人的素質(zhì)不斷提高,報告的用途越來(lái)越大,我們在寫(xiě)報告的時(shí)候要避免篇幅過(guò)長(cháng)。你知道怎樣寫(xiě)報告才能寫(xiě)的好嗎?下面是小編收集整理的生物實(shí)驗報告,僅供參考,大家一起來(lái)看看吧。

生物實(shí)驗報告 1
一、實(shí)驗目的
1. 初步學(xué)會(huì )探索酶催化特定化學(xué)反應的方法。
2. 探索淀粉酶是否只能催化特定的`化學(xué)反應。
二、實(shí)驗原理
淀粉和蔗糖都是非還原糖,它們在酶的催化作用下都能水解成還原糖,還原糖能夠與斐林試劑發(fā)生氧化還原反應,生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。
用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液,再用斐林試劑鑒定溶液中有無(wú)還原糖,就可以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學(xué)反應。
三、材料用具
滴管、試管、火柴、試管架、溫度計、三腳架、石棉網(wǎng)、酒精燈、燒杯、質(zhì)量分數為2%的新鮮淀粉酶溶液、質(zhì)量分數為3%的可溶性淀粉溶液、質(zhì)量分數為3%的蔗糖溶液、斐林試劑
四、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P47)
五、討論
1.制備的可溶性淀粉溶液,必須完全冷卻后才能使用。為什么?
。玻畠芍г嚬鼙貢r(shí),為什么要控制在60 ℃左右(低于50 ℃或高于75 ℃)?
3.如果2號試管也產(chǎn)生了磚紅色沉淀,可能是由哪些原因造成的?
生物實(shí)驗報告 2
一、實(shí)驗原理
當外界溶液濃度大于細胞液濃度時(shí),根據擴散作用原理,水分子會(huì )由細胞液中滲出到外界溶液中,通過(guò)滲透作用失水;由于細胞壁和原生質(zhì)層的伸縮性不同,細胞壁伸縮性較小,而原生質(zhì)層伸縮性較大,從而使二者分開(kāi);反之,外界溶液濃度小于細胞液濃度,則細胞通過(guò)滲透作用吸水,分離后的質(zhì)和壁又復原。
二、目的要求
1.初步學(xué)會(huì )觀(guān)察植物細胞質(zhì)壁分離和復原的方法;
2.理解植物細胞發(fā)生質(zhì)壁分離和復原的原理。
三、重點(diǎn)難點(diǎn)
1.初步掌握植物細胞質(zhì)壁分離和復原的實(shí)驗方法;
2.臨時(shí)裝片的制作;
3.低倍顯微鏡的使用。實(shí)驗器材:紫色洋蔥的鱗片葉、刀子、鑷子、滴管、載玻片、蓋玻片、吸水紙(濾紙代替,濾紙可分為剪開(kāi)幾條)、顯微鏡;
四、方法步驟
臨時(shí)裝片制作:
1、選材:選用紫色特別深的洋蔥外表皮;說(shuō)明:在實(shí)驗之前,最好將洋蔥放在水中浸泡一下,可以使洋蔥吸水多一些,而且代謝也比較旺盛,實(shí)驗效果明顯。
2、將洋蔥的外層剝去兩層(因為處于最外的可能已經(jīng)死亡)。取表皮:在洋蔥的外表皮上,用刀片劃“井”字,用鑷子輕輕撕取一小塊;(關(guān)鍵:最好撕取單層細胞,如果撕的太厚,則會(huì )使細胞重疊,嚴重影響實(shí)驗效果;)
3、制片:在載玻片中央滴上一滴純凈水,然后將取下的洋蔥表皮放在水中,輕輕展開(kāi)。確保洋蔥表皮平整無(wú)卷曲,并且水中不能有氣泡。接著(zhù),將蓋玻片以45°角慢慢放置在載玻片上,確保清水充滿(mǎn)載玻片和蓋玻片之間的空間,使其擠出所有空氣。
4、蓋玻片一端滴入糖水,于另一端用吸收紙重復幾次吸引(可重復幾次滴糖水和吸引的過(guò)程)。
質(zhì)壁分離實(shí)驗后可接著(zhù)進(jìn)行質(zhì)壁復原
質(zhì)壁復原實(shí)驗
處理
取下臨時(shí)裝片,在一側滴入清水,另一側再用吸水紙重復幾次吸引,以確保洋蔥表皮細胞完全浸在幾乎是清水中;(注:無(wú)吸水紙可先用濾紙代替)
觀(guān)察
在低倍鏡下觀(guān)察到一個(gè)細胞,發(fā)現了一個(gè)明顯的質(zhì)壁分離現象。細胞中央的液泡逐漸變大,顏色也變淺,最終細胞質(zhì)和細胞壁再次緊密結合在一起。如果質(zhì)壁分離沒(méi)有復原,那就說(shuō)明外部溶液的濃度過(guò)高,導致了細胞的`死亡。根據以上觀(guān)察,得出以下總結:當細胞內液體的濃度小于外部溶液的濃度時(shí),由于滲透作用,細胞會(huì )失去水分而發(fā)生質(zhì)壁分離現象;而當細胞內液體的濃度大于外部溶液的濃度時(shí),細胞則通過(guò)滲透作用吸收水分,并發(fā)生質(zhì)壁分離的復原現象。
分離實(shí)驗特例
如果外界溶液包括葡萄糖、硝酸鉀、氯化鈉、尿素和乙二醇等物質(zhì),當細胞進(jìn)行質(zhì)壁分離后,由于細胞主動(dòng)或被動(dòng)地吸收了溶質(zhì)微粒,導致細胞液濃度增加。這時(shí),植物細胞會(huì )通過(guò)吸水使質(zhì)壁分離部分自動(dòng)復原。
生物實(shí)驗報告 3
一觀(guān)察洋蔥表皮細胞
實(shí)驗目的:通過(guò)觀(guān)察洋蔥表皮細胞,說(shuō)明植物體是由細胞組成的實(shí)驗材料:顯微鏡、洋蔥、鑷子、滴管、水、載玻片、針、蓋玻片、吸水紙、紗布。實(shí)驗步驟:
。ㄒ)制做臨時(shí)裝片。
。1)用紗布將載玻片、蓋玻片擦干凈。
。2)用液管在載玻片上滴一滴清水。
。3)用鑷子在洋蔥鱗片葉上撕下一小片表皮。
。4)將撕下的表皮放入載玻片上的水滴中,用針將其展開(kāi)。
。5)用鑷子夾住蓋玻片,先將一邊接觸載玻片的水滴邊經(jīng)再慢慢把蓋玻片放平,制成臨時(shí)切片。
。4)在蓋玻片的翼側滴加稀碘液,用吸水紙從蓋玻片的另一側吸引,使染液浸潤標本的全部。
。ǘ┌惭b臨時(shí)裝片:將臨時(shí)切片放到顯微鏡上,調整顯微鏡與臨時(shí)切片位置,直到可以觀(guān)察到清晰的圖像為止實(shí)驗圖像:
200倍800倍
實(shí)驗結論:洋蔥表皮是由無(wú)數細胞構成的,有明顯的細胞核,細胞壁,細胞質(zhì)出現。
二.觀(guān)察人的口腔上皮細胞的實(shí)驗教案
1、學(xué)習要求:
1.制作和觀(guān)察人的口腔上皮細胞臨時(shí)裝片。2.認識人的口腔上皮細胞的基本結構。
2、材料用具:
生理鹽水,稀碘液,消毒牙簽,滴管,紗布,鑷子,吸水紙,載玻片,蓋玻片,顯微鏡。
3、實(shí)驗方法和步驟:
1.用潔凈的紗布將載玻片和蓋玻片擦拭干。
2.在載玻片中央滴一滴生理鹽水。
3.用消毒牙簽在口腔內側壁輕刮幾下放在生理鹽水中。
4.用鑷子夾起蓋玻片,使它的一邊先接觸載玻片上的水滴,再將蓋玻片緩緩放平蓋在水滴。
5.在蓋玻片的一側滴加幾滴稀碘液,用吸水紙在蓋玻片的另一側吸引,使碘液浸潤標本的全部。
總結步驟:
擦-→滴-→取-→蓋-→染-→吸五、繪制人的口腔上皮細胞
三.測定某種食物中的能量
實(shí)驗目標一顆花生種子含有多少能量?
實(shí)驗器材或藥品 水
實(shí)驗探究過(guò)程 現象
分析及結論
1、在錐形瓶中裝30ml水
實(shí)驗前水溫:
2、把花生固定在解剖20℃、20℃、24℃
針上
試驗后水溫:
3、在酒精燈上點(diǎn)燃花73℃、78℃、68℃
4.2J生并盡快把花生放到錐
溫差:×51×4.2=6300J
形瓶下面 53℃、58℃、44℃ 、待花生完全燒完后,平均值:51.666℃
一顆花生種子約含有6300J
實(shí)驗結的能量論
四.探究饅頭在口腔中的變化實(shí)驗報告
一、問(wèn)題的提出:取一塊饅頭放到口中咀嚼?谇恢械酿z頭要經(jīng)過(guò)牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及與唾液的混合。細細品嘗這時(shí)的饅頭,你能?chē)L出一些甜味來(lái)。饅頭變甜是否與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌有關(guān)呢?如果有關(guān),它們各起什么作用呢?饅頭變甜是否是淀粉發(fā)生了變化?
二、作出假設饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關(guān)。饅頭變甜是因為淀粉被唾液中的唾液淀粉酶分解成了帶有甜味的麥芽糖。在這個(gè)過(guò)程中,通過(guò)牙齒的咀嚼將饅頭嚼碎,舌的攪拌使饅頭碎屑與唾液充分混合。
三、制定計劃
。ㄒ唬⿲(shí)驗原理
饅頭變甜應該是成分中糖類(lèi)發(fā)生變化。饅頭的主要成分是淀粉,因此本實(shí)驗利用淀粉遇碘變藍的特性,以及口腔中的溫度為37℃的常識?刂谱兞客僖,以及模擬牙齒的咀嚼作用和舌的攪拌作用。三支試管,兩個(gè)對照實(shí)驗。一支試管作為實(shí)驗組,另兩支試管作為對照組。如果模擬牙齒的咀嚼功能、舌的攪拌功能并加入唾液,滴入碘液后,實(shí)驗組的試管內沒(méi)有變成藍色,說(shuō)明饅頭中淀粉的變化與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關(guān)。如果變成藍色,則說(shuō)明淀粉沒(méi)有被分解,饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌沒(méi)有關(guān)系。
。ǘ⿲(shí)驗變量的控制
兩個(gè)對照實(shí)驗。一個(gè)對照實(shí)驗的實(shí)驗變量是唾液,實(shí)驗組內加入唾液2ml,對照組試管加入2ml清水。另一個(gè)對照實(shí)驗的'實(shí)驗變量是饅頭塊的狀態(tài):實(shí)驗組的饅頭塊用刀切碎,放入試管中并震蕩試管,對照組的饅頭塊不做任何處理,直接整塊放入試管中,并且不震蕩試管。
。ㄈ⿲(shí)驗方案實(shí)驗材料用具
饅頭塊(三小塊等大)試管(三支)燒杯(三個(gè))盛唾液的小燒杯滴管溫度計石棉網(wǎng)三腳架碘液小刀小木板
1.取新鮮的饅頭,切成大小相同的A、B、C三小塊。將A塊和B塊分別用刀細細地切碎,拌勻(模擬牙齒的咀嚼和舌的攪拌),C塊不做任何處理。
2.用涼開(kāi)水將口漱凈,口內含一塊消毒棉絮。約1分鐘之后,用干凈的鑷子取出棉絮,將棉絮中的唾液擠壓到小燒杯中。
3.取3支潔凈的試管,分別編上(1)、(2)、(3)號,然后做如下處理:
將A饅頭碎屑放入(1)號試管中,注入2ml唾液并震蕩試管;將B饅頭碎屑放入(2)號試管,注入2ml清水并震蕩試管;將C饅頭放入(3)號試管,不震蕩。將三支試管一起放入37℃左右的溫水中。4.5-10分鐘后,取出這三支試管,各滴加2滴碘液,搖勻。然后,觀(guān)察并記錄各試管中的顏色變化。
四:實(shí)施計劃
按確定的探究計劃進(jìn)行實(shí)驗,觀(guān)察實(shí)驗現象?梢(jiàn),(1)號試管中沒(méi)有變成藍色;(2)號試管變成藍色;(3)號試管中的饅頭塊部分變成藍色。
五、分析實(shí)驗結果,得出結論
分析實(shí)驗現象,(1)號試管中滴入碘液后,沒(méi)有變成藍色,說(shuō)明試管中已經(jīng)沒(méi)有淀粉,淀粉被唾液中的唾液淀粉酶分解成麥芽糖了,麥芽糖沒(méi)有遇碘變藍的特性,所以滴入碘液后不變藍。(2)號試管中加入的是清水和饅頭碎屑,水沒(méi)有消化淀粉的作用,因此,滴入碘液后,饅頭碎屑中淀粉遇碘變成藍色。(3)號試管中只有部分變成藍色,說(shuō)明饅頭與唾液的接觸不充分,只有部分淀粉被分解。由此,得出結論:說(shuō)明饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關(guān)系。因為上述活動(dòng)模擬了消化與唾液的分泌以及牙齒的咀嚼、舌的攪拌,(1)號試管中的饅頭接觸到了足量的唾液,并被消化。
生物實(shí)驗報告 4
一、實(shí)驗目的
1. 初步學(xué)會(huì )觀(guān)察植物細胞質(zhì)壁分離和復原的方法。
2. 理解植物細胞發(fā)生滲透作用的原理。
二、實(shí)驗原理
當細胞液的濃度低于外界溶液的'濃度時(shí),水分會(huì )通過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入外界溶液中,導致細胞壁和原生質(zhì)層發(fā)生收縮。因為原生質(zhì)層的收縮性大于細胞壁,隨著(zhù)細胞不斷失水,原生質(zhì)層逐漸與細胞壁分離,即發(fā)生了質(zhì)壁分離。相反,當細胞液的濃度高于外界溶液的濃度時(shí),外界溶液中的水分會(huì )通過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入細胞液中,原生質(zhì)層會(huì )逐漸恢復到原來(lái)的狀態(tài),從而使植物細胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復原。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P60)
五、討論
1. 如果把洋蔥表皮細胞浸泡在與細胞液等滲的蔗糖溶液中,這些細胞會(huì )發(fā)生質(zhì)壁分離現象。
2.當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時(shí),紅細胞會(huì )不會(huì )發(fā)生質(zhì)壁分離現象?為什么?
3.繪制一組模式圖,描述一個(gè)細胞在正常狀態(tài)下,經(jīng)過(guò)處理后的變化。首先將細胞放入0.3g/ml蔗糖溶液中處理,然后再經(jīng)過(guò)清水處理。
生物實(shí)驗報告 5
一、實(shí)驗目的:
1、通過(guò)對原核和真核各種形態(tài)細胞的光學(xué)顯微鏡觀(guān)察,了解細胞的形態(tài)及其顯微結構;
2、學(xué)習顯微測量的方法,對細胞的大小有一直觀(guān)認識。
二、實(shí)驗材料和儀器:
小白鼠肝細胞切片;雞血紅細胞;蠶豆葉片橫切片;
普通光學(xué)顯微鏡;目鏡測微尺;鏡臺測微尺;載玻片;蓋玻片。
三、實(shí)驗步驟:
(一)細胞形態(tài)觀(guān)察
l、動(dòng)物細胞的觀(guān)察
。1)人肝細胞切片:在顯微鏡下仔細觀(guān)察肝細胞的形態(tài)構造。
。2)雞血細胞涂片的觀(guān)察:觀(guān)察血細胞的組成;紅細胞、白細胞、血小板的形態(tài)特點(diǎn)。
2、植物細胞的觀(guān)察
取蠶豆葉片橫切片的觀(guān)察:注意表皮細胞和葉肉細胞的基本結構。
。ǘ┘毎拇笮『蜏y量
1、卸下目鏡的上透鏡,將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上,再旋上目鏡的上透鏡。
2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好,使測微尺分度位于視野中央。調焦至能看清鏡臺測微尺的分度。
3、小心移動(dòng)鏡臺測微尺和轉動(dòng)目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊,可轉動(dòng)目鏡上透鏡進(jìn)行調焦),使兩尺左邊的一直線(xiàn)重合,然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線(xiàn)。
4、記錄兩條重合線(xiàn)間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm:
鏡臺測微尺的格數
目鏡測微尺每格的微米數=————————— × 10
目鏡測微尺的.格數
四、實(shí)驗結果:
1、目鏡校正:40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數=17/70=0.24
2、細胞大小的測量:
五、作業(yè)與思考:
1、血細胞按含量高低,主要含有:紅細胞,白細胞,血小板。
白細胞最大,紅細胞次之,血小板最小。紅細胞:主要的功能是運送氧。 白細胞:主要扮演了免疫的角色,當病菌侵入人體時(shí),白細胞能穿過(guò)毛細血管壁,集中到病菌入侵部位,將病菌包圍,吞噬。血小板:止血過(guò)程中起著(zhù)重要作用。細胞形態(tài)見(jiàn)下圖。
2、植物細胞一般比動(dòng)物細胞大一些。形態(tài)圖見(jiàn)下。
3、在不同放大倍數下,測定的細胞大小基本一致,但有一些偏差。放大倍數越大,在視野中同等實(shí)際距離下的兩點(diǎn)視野距離更大,而更容易測量準確。
生物實(shí)驗報告 6
一、實(shí)驗目的
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。
二、實(shí)驗原理
1、還原糖的鑒定原理
生物組織中普遍存在的還原糖種類(lèi)較多,常見(jiàn)的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內都含有還原性基團(游離醛基或游離酮基),因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒(méi)有游離的半縮醛羥基,因此叫做非還原性糖,不具有還原性。本實(shí)驗中,用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否,而不能鑒定非還原性糖。
斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05 g/mL的'硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下:
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),溶液的顏色變化過(guò)程為:淺藍色棕色磚紅色(沉淀)。
2、蛋白質(zhì)的鑒定原理
鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液(A)和質(zhì)量濃度為0.01 g/mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡(luò )合物,這個(gè)反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此,蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應。
3、脂肪的鑒定原理
脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色,被蘇丹Ⅳ染成紅色
三、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P18)
四、實(shí)驗用品(見(jiàn)書(shū)P18)
五、注意
1、關(guān)于鑒定還原糖的實(shí)驗,在加熱試管中的溶液時(shí),應該用試管夾夾住試管上部,并放入盛開(kāi)水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部,同時(shí)試管口不要朝向實(shí)驗者,以免試管內溶液沸騰時(shí)沖出試管,造成燙傷。如果試管內溶液過(guò)于沸騰,可以上提試管夾,使試管底部離開(kāi)大燒杯中的開(kāi)水。
2、斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用,切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3、蛋白質(zhì)的鑒定中先加雙縮脲A,再加雙縮脲B
六、討論
鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的根據是什么?
生物實(shí)驗報告 7
實(shí)驗名稱(chēng):
用高倍顯微鏡觀(guān)察葉綠體和細胞質(zhì)流動(dòng)
一、實(shí)驗目的
1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2.觀(guān)察高等植物的葉綠體在細胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布
二、實(shí)驗原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運動(dòng),改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣;罴毎械募毎|(zhì)處于不斷的.流動(dòng)狀態(tài),觀(guān)察細胞質(zhì)的流動(dòng),可以用細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運動(dòng)做為標志。
三、材料用具
蘚類(lèi)的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養皿,鉛筆
四、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P30)
1.制作蘚類(lèi)葉片的臨時(shí)裝片
2.用顯微鏡觀(guān)察葉綠體
3.制作黑藻葉片臨時(shí)裝片
4.用顯微鏡觀(guān)察細胞質(zhì)流動(dòng)
五、討論
1.細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動(dòng),為什么?
2.葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?
3.植物細胞的細胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),這對于活細胞完成生命活動(dòng)有什么意義?
4.用鉛筆畫(huà)一個(gè)葉片細胞,標出葉綠體的大致流動(dòng)方向。
生物實(shí)驗報告 8
實(shí)驗目的
1、學(xué)習并掌握動(dòng)物細胞培養的無(wú)菌操作技術(shù)。
2、了解原代細胞培養的基本方法及操作過(guò)程。
3、學(xué)習細胞計數及營(yíng)養液的配制。
實(shí)驗原理
1、細胞原代培養
原代細胞培養是指直接從動(dòng)物體內獲取的細胞、組織和器官,經(jīng)體外培養后,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無(wú)菌操作的方法,從動(dòng)物體內取出所需的組織(或器官),經(jīng)消化,分解成單個(gè)游離細胞,在人工培養下,使其不斷的生長(cháng)及繁殖。
細胞培養是一種操作繁瑣而又要求十分嚴謹的實(shí)驗技術(shù)。要使細胞能在體外長(cháng)期生長(cháng),必須滿(mǎn)足兩個(gè)基本要求:
一是供給細胞存活所必須的條件,如適量的水、無(wú)機鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關(guān)的生長(cháng)因子、氧氣、適宜的溫度,注意外環(huán)境酸堿度與滲透壓的調節。
二是嚴格控制無(wú)菌條件。
2、細胞死活鑒定死活細胞的'鑒定方法有很多種,常用的有染色法和儀器分析法。染色法是常用的細胞死活鑒定方法,簡(jiǎn)便,易于操作。不同的死活細胞鑒定方法有各自不同具體的反應機理,但無(wú)論采用何種辦法,都是利用了死活細胞在生理機能和性質(zhì)上的差異。
染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法,根據染色機理的不同,染料或使死細胞著(zhù)色,或使活細胞著(zhù)色。
死活細胞在生理機能和性質(zhì)上的差異主要包括:
1、死活細胞細胞膜通透性的差異:活細胞的細胞膜是一種選擇性膜,對細胞起保護和屏障作用,只允許物質(zhì)選擇性的通過(guò);而細胞死亡之后,細胞膜受損,通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。臺盼藍,又稱(chēng)錐藍,是一種陰離子型染料,不能通過(guò)完整的細胞膜。所以經(jīng)臺盼藍染色后只能使死細胞著(zhù)色,而活細胞不被著(zhù)色。甲基藍有類(lèi)似的染色機理。植物細胞的質(zhì)壁分離也可鑒定死活。
2、死活細胞在代謝上的差異:是采用美藍染料鑒定酵母細胞死活的依據。美藍是一種無(wú)毒染料,氧化型為藍色,還原型為無(wú)色。由于活細胞中新陳代謝的作用,使細胞內具有較強的還原能力,能使美藍從藍色的氧化性變?yōu)闊o(wú)色的還原型,因此美藍染色后活的酵母細胞無(wú)色;而死細胞或代謝緩慢的老細胞,則因它們的無(wú)還原能力或還原能力極弱,使美藍處于氧化態(tài),從而被染成藍色或淡藍色。
除此之外,還有一些細胞器的專(zhuān)有染料。如液泡系的專(zhuān)有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料,可以使活細胞液泡著(zhù)紅色,而細胞質(zhì)和細胞核不被著(zhù)色;死細胞的液泡不被著(zhù)色或淺染,染料彌散于整個(gè)細胞中,細胞核和細胞質(zhì)被染成紅色。有時(shí)侯為了增加染色效果可以將兩種染料結合使用,如甲基藍-中性紅混合染色法。
實(shí)驗用品
1、材料小白鼠
2、試劑
臺盼藍、伊紅、PBS緩沖液、細胞培養液(含生長(cháng)因子)
3、器材
剪子、棉球、75%酒精、移液槍、無(wú)菌操作臺、正置光學(xué)顯微鏡、倒置光學(xué)顯微鏡、解剖盤(pán)、滴管、離心管、離心機、注射器、Eppendorf管、培養皿、酒精燈、塑料培養皿、載玻片、蓋玻片、血細胞計數板
實(shí)驗步驟
1、取材
取小鼠一只,采用斷頭法處死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min,取出轉入超凈工作臺內的解剖盤(pán)中,無(wú)菌操作打開(kāi)腹腔,取出其脾臟,除去其周?chē)闹窘M織,并用PBS液自上而下淋洗1-2次,轉入無(wú)菌培養皿中待用。
2、分離脾細胞
用滴管向培養皿中注入30滴PBS緩沖液,再用“L”型針頭注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾臟,注射時(shí)沿長(cháng)軸注射。然后再用針頭在脾臟上扎眼,并用“L”型針頭輕輕刮出脾細胞。在均勻吹勻脾臟細胞。
吸取上述分離的單個(gè)脾細胞懸液,放入Eppendorf管中,使量至1mL,以1000r/min離心5min。
3、培養脾細胞
取塑料培養皿一套,用移液槍吸取培養液2mL加入塑料皿中,并將皿標記待用。取離心后的Eppendorf管,棄去上清液,用移液槍?zhuān)?00ul)吸取塑料皿中的培養液400ul加入棄去上清的Eppendorf管中,用槍頭吹勻管底的脾細胞,吸取200ul脾細胞懸液接種于上述塑料皿中,混勻后放入37°C,5%CO2的培養箱中培養。
4、配制染液
用生理鹽水配成5%臺盼藍染液,備用。
5、染色
取0.5mL細胞懸濁液放入試管中,加入1-2滴染液;旌。2-5min后將細胞放在血細胞計數板上觀(guān)察死活情況,注意不要有氣泡產(chǎn)生,放大倍數為10x10。染色后活細胞不著(zhù)色,死細胞顯示藍色。注意染色時(shí)間不能超過(guò)15min,否則染液將細胞毒殺。
6、計數
在10x10倍的顯微鏡下觀(guān)察,計算血細胞計數板的4個(gè)4小方格的細胞數量。包括細胞總數與死細胞數量。壓線(xiàn)者計上不計下,計左不計右。
7、計算細胞活力
根據公式:細胞活力=(總細胞數-死細胞數)/總細胞數×100%
實(shí)驗結果
臺盼藍染色后的細胞(10x10)伊紅染色后的細胞(10x10)
總細胞數和活細胞數統計表(10×10)
項目自己培養細胞老師培養細胞總細胞數個(gè)/ml活細胞數個(gè)/ml細胞活力1.4×1067.5×1053.0×1055.5×10521.4%73.3%
分析與討論
1、結果分析
本次實(shí)驗中我們小組自己培養細胞所測細胞活力為21.4%,并不算高,分析得應有以下原因可能影響實(shí)驗結果(包括誤差):
、湃粼跓o(wú)菌操作的過(guò)程中操作不規范,導致染菌,會(huì )極大的影響觀(guān)察,導致實(shí)驗失敗。
、迫粼陔x心分離呈單細胞的過(guò)程中離心機轉速過(guò)快或時(shí)間過(guò)長(cháng)很可能會(huì )導致細胞破裂,導致小鼠脾細胞大量死亡。
、侨旧珪r(shí)間過(guò)長(cháng),或觀(guān)察時(shí)間過(guò)長(cháng)都會(huì )導致染色試劑將細胞殺死,使細胞活力驟降,這是導致細胞活力比較低的重要原因。
、葘(shí)驗中的一些操作不正確或不規范的情況、計算帶來(lái)的誤差等也會(huì )直接導致實(shí)驗誤差。
2、注意事項
、艊栏襁M(jìn)行動(dòng)物消毒,需用75%酒精消毒。
、茋栏襁M(jìn)行無(wú)菌操作,防止細菌、霉菌、支原體污染,避免化學(xué)物質(zhì)污染。
、俏∫后w前,瓶口和吸管硬行火焰消毒;吸取液體時(shí),避免碰撞。
、入x心管入臺前,管口、管壁應消毒。
、蓪(shí)驗者離開(kāi)超凈臺時(shí),要隨時(shí)用肘部關(guān)閉工作窗。
、势鞑氖褂脮r(shí)既要注意用火焰消毒,又要防止燙傷、燙死細胞。
生物實(shí)驗報告 9
一、實(shí)驗目的:
1、掌握顯示細胞中過(guò)氧化物酶反應的原理和方法。
2、了解細胞凋亡的生物學(xué)意義
3、掌握凋亡細胞的形態(tài)學(xué)檢測方法
二、實(shí)驗原理:
1、細胞內的過(guò)氧化物酶能把許多胺類(lèi)氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標本,細胞內的過(guò)氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍色的聯(lián)苯胺藍,進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據顏色反應來(lái)判定過(guò)氧化物酶的有無(wú)或多少。中間產(chǎn)物藍色聯(lián)苯胺是不穩定的,無(wú)需酶的參加即可氧化為棕色化合物。
2、細胞凋亡是指細胞在生理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結束其生命的過(guò)程。它是一個(gè)主動(dòng)的、高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過(guò)程。
3、凋亡細胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細胞質(zhì)濃縮;細胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周?chē)?邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體;根據細胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行顯微觀(guān)察是檢測細胞凋亡的一種直觀(guān)、可靠的方法。
三、實(shí)驗步驟:
細胞中過(guò)氧化物酶的顯示
1、在載片上滴一滴PBS緩沖液;
2、取骨髓細胞:用斷頸法處死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剝出后肢股骨,剪開(kāi)股骨一端,用牙簽尖的一端插入剪開(kāi)的小孔中,摳取少許骨髓細胞置滴有PBS的載片上;
3、涂片:用另一玻片將骨髓細胞沿一個(gè)方向涂布推開(kāi),室溫晾干;
4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸銅液,以蓋滿(mǎn)涂片為宜,處理30秒-1分鐘。
5、傾去硫酸銅液,直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應6分鐘(以蓋滿(mǎn)涂片為宜)
6、清水沖洗,番紅復染2min。
7、鏡檢:清水沖洗,室溫晾干,先低倍鏡下觀(guān)察,后換高倍鏡下觀(guān)察(油鏡100×)
細胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測與觀(guān)察吉姆薩染色:
1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)
2、生理鹽水輕輕漂洗細胞
3、95%乙醇固定5min
4、PBS緩沖液洗2次
5、吉姆薩染色液染色5min
6、蒸餾水輕輕洗去染液
7、普通光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察。
吖啶橙染色:
1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)
2、生理鹽水輕輕漂洗細胞
3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min
4、PBS緩沖液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
6、選用藍光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀(guān)察。
四、結果與分析:
根據隨機選擇的`幾個(gè)視野的統計,該樣品的細胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela細胞凋亡過(guò)程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化(吖啶橙染色)
五、思考題:
1、細胞凋亡的調控機制
細胞凋亡是一個(gè)受基因調控、眾多細胞膜受體和胞漿蛋白參與的細胞主動(dòng)自殺過(guò)程,其觸發(fā)因素多種多樣,包括細胞內誘導因子和抑制因子對細胞凋亡的調控。
2、細胞凋亡的特征
凋亡細胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細胞質(zhì)濃縮;細胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周?chē)?邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體。
3、研究細胞凋亡的方法
定性的研究方法:常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場(chǎng)倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀(guān)察(普通光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)
定量或半定量的研究方法:各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。
生物實(shí)驗報告 10
一、實(shí)驗目的
1、觀(guān)察植物細胞有絲分裂的過(guò)程,識別有絲分裂的不同時(shí)期。
2、初步掌握制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技能。
3、初步掌握繪制生物圖的方法。
二、實(shí)驗原理
在植物體中,有絲分裂常見(jiàn)于根尖、莖尖等分生區細胞,高等植物細胞有絲分裂的過(guò)程,分為分裂間期和分裂期的前期、中期、后期、末期?梢杂酶弑讹@微鏡觀(guān)察植物細胞的有絲分裂的過(guò)程,根據各個(gè)時(shí)期細胞內染色體(或染色質(zhì))的變化情況,識別該細胞處于有絲分裂的哪個(gè)時(shí)期,細胞核內的染色體容易被堿性染料著(zhù)色。
三、材料用具
洋蔥根尖、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、培養皿、鉛筆、質(zhì)量分數為15%的鹽酸、體積分數為95%的酒精、質(zhì)量分數為0.01g/ml的龍膽紫(或紫藥水)
四、實(shí)驗過(guò)程
1、洋蔥根尖的培養(提前3—4天)
2、解離:5min
3、漂洗:10min
4、染色:5min
5、制片
6、鏡檢
五、注意
1、解離充分是實(shí)驗成功的.必備條件。解離充分,組織才能分散,細胞也不會(huì )重疊。
2、漂洗時(shí)間一定要足夠,否則細胞染不上色。
3、染色時(shí),染液的濃度和染色時(shí)間必須掌握好。特別是染色不能過(guò)深,否則鏡下一片紫色,無(wú)法觀(guān)察。
六、討論
1、制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?談?wù)勀阕约旱捏w會(huì )。
2、在觀(guān)察清楚有絲分裂各個(gè)時(shí)期的細胞以后,繪出洋蔥根尖細胞有絲分裂的簡(jiǎn)圖,并標明時(shí)期。
生物實(shí)驗報告 11
實(shí)驗名稱(chēng):
觀(guān)察洋蔥表皮細胞。
實(shí)驗目的:
1、學(xué)習制作洋蔥表皮玻片標本。
2、學(xué)會(huì )使用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮,用圖畫(huà)記錄觀(guān)察到的洋蔥表皮細胞。
3、對比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。
實(shí)驗重點(diǎn):
用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。
實(shí)驗難點(diǎn):
正確使用顯微鏡。
實(shí)驗準備:
分組實(shí)驗器材:顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。
實(shí)驗過(guò)程:
一、導入課題
出示洋蔥。問(wèn):如果從它的內表皮上揭下一塊,用顯微鏡來(lái)觀(guān)察能看到些什么呢?(板書(shū)課題)
二、制作洋蔥表皮玻片標本
1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標本的方法與步驟。
。1)在一個(gè)干凈的玻璃載片中間滴一滴清水;
。2)用小刀在洋蔥鱗葉片內壁劃一個(gè)“井”字,用鑷子取下“井”中洋蔥內表皮放到載玻片的水滴中央,注意標本要平展開(kāi),不能折疊;
。3)用蓋玻片傾斜著(zhù)蓋到標本上面,放蓋玻片時(shí),先放一端,再慢慢放下另一端,注意不要有氣泡。如水不足,可沿蓋玻片邊緣滴加;若水分過(guò)多,可用吸水紙吸掉;
。4)從蓋玻片的`一邊滴一滴稀釋的碘酒,并把玻片微微傾斜,再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水;
。5)洋蔥表皮玻片標本做成可進(jìn)行觀(guān)察。
2、學(xué)生以組為單位自制玻片標本(最好制三份裝片,便于下面的對比觀(guān)察),教師巡視指導(教育學(xué)生注意安全)。
三、觀(guān)察洋蔥表皮細胞
1、先用肉眼觀(guān)察洋蔥表皮將看到的內容畫(huà)在科學(xué)記錄本上。
2、再用放大鏡觀(guān)察洋蔥表皮將看到的內容畫(huà)到科學(xué)記錄本上。
3、學(xué)生交流用肉眼和放大鏡分別觀(guān)察到什么?它們有何不同?
4、利用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。
。1)、出示顯微鏡,引導學(xué)生認識顯微鏡,簡(jiǎn)介各部分的名稱(chēng)、功能及使用方法,學(xué)生每5人一組操作熟悉顯微鏡。
。2)、各組利用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。(師操作演示:安放――對光――上片――調焦――觀(guān)察。生一步步跟著(zhù)操作。)
。3)、學(xué)生觀(guān)察、記錄、描畫(huà)洋蔥表皮細胞。教師巡視指導,各組的實(shí)驗組長(cháng)監督組員操作是否規范,要求每個(gè)人都要操作、都要觀(guān)察,并將觀(guān)察結果進(jìn)行交流。組長(cháng)將大家在顯微鏡下的發(fā)現畫(huà)到科學(xué)記錄本上。
5、全班交流在顯微鏡下的發(fā)現。
。1)各組推薦發(fā)言代表談自己的發(fā)現。
。2)各組將所畫(huà)的觀(guān)察結果向全班展示。
。3)交流討論評價(jià)。
6、師小結:我們發(fā)現放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的細節更多,更清楚。我們發(fā)現洋蔥表皮是由一個(gè)個(gè)比較規則的多邊形組成的,而且大多呈長(cháng)方形,外為細胞壁,內為無(wú)色細胞質(zhì)和細胞核。洋蔥表皮上的一個(gè)個(gè)小房間似的結構,就是洋蔥的細胞。(師一邊描述一邊畫(huà)洋蔥細胞簡(jiǎn)圖)
四、實(shí)驗結束。
回收實(shí)驗器材,整理實(shí)驗桌。
生物實(shí)驗報告 12
一、實(shí)驗目的
1. 初步學(xué)會(huì )探索酶催化特定化學(xué)反應的方法。
2. 探索淀粉酶是否只能催化特定的化學(xué)反應。
二、實(shí)驗原理
淀粉和蔗糖都是非還原糖,它們在酶的催化作用下都能水解成還原糖,還原糖能夠與斐林試劑發(fā)生氧化還原反應,生成磚紅色的`氧化亞銅沉淀。
用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液,再用斐林試劑鑒定溶液中有無(wú)還原糖,就可以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學(xué)反應。
三、材料用具
滴管、試管、火柴、試管架、溫度計、三腳架、石棉網(wǎng)、酒精燈、燒杯、質(zhì)量分數為2%的新鮮淀粉酶溶液、質(zhì)量分數為3%的可溶性淀粉溶液、質(zhì)量分數為3%的蔗糖溶液、斐林試劑
四、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P47)
五、討論
1.制備的可溶性淀粉溶液,必須完全冷卻后才能使用。為什么?
2.兩支試管保溫時(shí),為什么要控制在60 ℃左右(低于50 ℃或高于75 ℃)?
3.如果2號試管也產(chǎn)生了磚紅色沉淀,可能是由哪些原因造成的?
生物實(shí)驗報告 13
一、實(shí)驗目的:
1、學(xué)會(huì )如何使用顯微鏡觀(guān)察細胞;
2、了解細胞的結構;
3、學(xué)會(huì )制作臨時(shí)裝片。
二、實(shí)驗材料:
。▽(shí)驗材料可換)松針、動(dòng)物血液、動(dòng)物神經(jīng)細胞永久裝片
三、實(shí)驗用具:
載玻片、蓋玻片、蒸餾水、滴管、鑷子、土豆、刀片、顯微鏡(物鏡5X、10X、40X)
四、方法步驟:
1、制作松針的臨時(shí)切片:
。1)取干凈的載玻片一個(gè)平置于試驗臺上,用滴管在載玻片中央滴一滴蒸餾水。
。2)將土豆切成條狀(截面約:0.5X0.5cm)取兩條,將一根松針夾在兩個(gè)土豆條之間,用刀片削成盡量薄的薄片,削時(shí),手腕不動(dòng),靠大臂帶動(dòng)小臂移動(dòng)刀片。切片數次。從中選取較薄的切片,置于載玻片的水滴上。
。3)從一側輕輕蓋上蓋玻片,不要產(chǎn)生氣泡。用吸水紙輕輕吸去蓋玻片周?chē)乃,即完成臨時(shí)切片的制作。
2、觀(guān)察切片:
。1)取出顯微鏡,置于試驗臺上靠左的位置,打開(kāi)光源。
。2) 將上步制作好的切片置于顯微鏡的載物臺上,調整載物臺位置,使蓋玻片對準光源。
。3)使用5X物鏡觀(guān)察切片,使松針切片在視野中心,換成10X物鏡,觀(guān)察松針葉面橫切結構。
。4)換成40X物鏡觀(guān)察,注意細胞及細胞內物質(zhì)結構,畫(huà)圖。
3、動(dòng)物血液臨時(shí)裝片的制作及觀(guān)察(除了不用切片,其他類(lèi)似)
4、 動(dòng)物神經(jīng)細胞永久裝片的觀(guān)察。
五、反思:
1、松針的葉面結構是什么樣的?
2、動(dòng)物細胞的結構是什么樣的?與植物細胞又什么不同?
3、顯微鏡的物鏡倍數愈大,視野的`亮度如何?物體的大小如何?
4、如何調節焦距?
5、如何才能使切片盡量的?切片的厚薄對顯微鏡下觀(guān)察的效果有什么影響。
生物實(shí)驗報告 14
一、【實(shí)驗目的】
1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質(zhì)粒DNA的原理和方法。
2、學(xué)習并掌握凝膠電泳進(jìn)行DNA的分離純化的實(shí)驗原理。
3、學(xué)習并掌握凝膠的制備及電泳方法。
4、學(xué)習并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。
二、【實(shí)驗原理】
1、質(zhì)粒DNA的制備方法
質(zhì)粒(Plasmid)是獨立存在于染色體外、能自主復制并能穩定遺傳的一種環(huán)狀雙鏈DNA分子,分布于細菌、放線(xiàn)菌、真菌以及一些動(dòng)植物細胞中,但在細菌細胞中含量最多。細菌質(zhì)粒大小介于1~200Kb之間,是應用最多的質(zhì)粒類(lèi)群,在細菌細胞內它們利用宿主細胞的復制機構合成質(zhì)粒自身的DNA。
質(zhì)粒DNA的制備包括3個(gè)步驟:
、倥囵B細菌,使質(zhì)粒DNA大量擴增;
、谑占土呀饧毦;
、鄯蛛x和純化質(zhì)粒DNA。主要方法包括:堿裂解法:0.2molNaOH+1%SDS;煮沸裂解法:沸水煮沸40秒;SDS裂解法:10%SDS,一般用于質(zhì)粒大量提取。在實(shí)際操作中可以根據宿主菌株類(lèi)型、質(zhì)粒分子大小、堿基組成和結構等特點(diǎn)以及質(zhì)粒DNA的用途進(jìn)行選擇。本實(shí)驗選擇堿裂解法提取質(zhì)粒DNA。
2、質(zhì)粒DNA的提取——堿變性提取法
在細菌細胞中,染色體DNA和質(zhì)粒DNA均被釋放出來(lái),但是兩者變性與復性所依賴(lài)的溶pH值不同。在pH值高達12.0的堿性溶液中,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開(kāi)而變性;共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵斷裂,但兩條互補鏈不完全分離。因為它們在拓撲學(xué)上是相互纏繞的。當用pH值4.6的KAc(NaAc)高鹽溶液調節堿性溶液至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA可恢復原來(lái)的共價(jià)閉合環(huán)狀超螺旋結構而溶解于溶液中;但染色體DNA不能復性,而是與不穩定的大分子RNA、蛋白質(zhì)—SDS復合物等一起形成纏連的、可見(jiàn)的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過(guò)離心,與復性的溶于溶液的質(zhì)粒DNA分離。溶于上清液的質(zhì)粒DNA,可用無(wú)水乙醇和鹽溶液,使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質(zhì)類(lèi)似,乙醇沉淀DNA的同時(shí),也伴隨著(zhù)RNA沉淀,可利用RNaseA將RNA降解。質(zhì)粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白,可通過(guò)酚/氯仿抽提除去,最后獲得純度較高的質(zhì)粒DNA。
3、凝膠電泳進(jìn)行DNA分離純化
電泳(electrophoresis)是帶電物質(zhì)在電場(chǎng)中向著(zhù)與其電荷相反的電極方向移動(dòng)的現象。各種生物大分子在一定pH條件下,可以解離成帶電荷的離子,在電場(chǎng)中會(huì )向相反的電極移動(dòng)。凝膠是支持電泳介質(zhì),它具有分子篩效應。含有電解液的凝膠在電場(chǎng)中,其中的電離子會(huì )發(fā)生移動(dòng),移動(dòng)的速度可因電離子的大小形態(tài)及電荷量的不同而有差異。利用移動(dòng)速度差異,就可以區別各種大小不同的分子。因而,凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段,是分子生物學(xué)的核心技術(shù)之一。
凝膠電泳技術(shù)操作簡(jiǎn)單而迅速,分辨率高,分辨范圍廣。此外,凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠(ethidium bromide,EB)或SYBR Gold染色直接觀(guān)察到,甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發(fā)下也能直接檢測到。需要的話(huà),這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收,用于各種各樣目的的實(shí)驗。
分子生物學(xué)中,常用的兩種凝膠為瓊脂糖(agarose)和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑,也能以許多不同的構型和方位進(jìn)行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高,使用于較小分子核酸(5—500bp)的分離和蛋白質(zhì)電泳。它的分辨率非常高,長(cháng)度上相差1bp或質(zhì)量上相差0.1%的DNA都可以彼此分離,這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行DNA序列分析的分子基礎。雖然它能很快地進(jìn)行電泳,并能容納較大的DNA上樣量,但是與瓊脂糖凝膠相比,在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長(cháng)鏈狀多聚物,由β—D—吡喃半乳糖與3,6—脫水—L—吡喃半乳糖組成,相對分子質(zhì)量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右,即可溶化形成清亮、透明的液體,澆在模版上冷卻后形成凝膠,其凝固點(diǎn)為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低,但它的分離范圍更大(50至百萬(wàn)bp),小片段DNA(50—20000bp)最適合在恒定輕度和方向的電場(chǎng)中水平方向的瓊脂糖凝膠內電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作,適用于核酸電泳,測定DNA的相對分子質(zhì)量,分離經(jīng)限制酶水解的DNA的片段,進(jìn)一步純化DNA等。
瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中,由于核酸有磷酸基而帶有負電荷,在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)。DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個(gè)因素:樣品DNA分子的大小、DNA分子的構象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場(chǎng)、緩沖液和溫度。
三、【實(shí)驗材料】
1、實(shí)驗儀器
培養皿、接種環(huán)、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養箱、50ml離心管、1.5ml塑料離心管(Eppendorf管)、高速離心機、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛生紙和記號筆、手套等。
2、實(shí)驗試劑
LB培養基,抗生素Ap(氨芐青霉素),溶液Ⅰ,溶液Ⅱ,溶液Ⅲ,RNaseA母液,TE緩沖液,飽和酚,氯仿/異戊醇混合液,酚/氯仿/異戊醇(PCI)混合液,預冷無(wú)水乙醇,TAE電泳緩沖液(10×),上樣緩沖液(6×),瓊脂糖,溴化乙錠(EB),DNA相對分子質(zhì)量標準物DNA Marker λ/Hind Ⅲ,5mol/L pH 5.2的醋酸鈉。
四、【實(shí)驗步驟】
1、準備實(shí)驗
配制LB液體培養基,分裝到100ml的三角瓶中20ml,300ml的三角瓶中50ml,另配LB固體培養基;準備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒,1.5ml離心管若干于500ml三角瓶中,50ml離心管2個(gè) ,將上述物品包好連同配好的培養基一同滅菌。
2、菌體培養
在含有Ap的LB平板上挑取一環(huán)攜帶有質(zhì)粒pUC19的E。coli DH5單菌落,接種于20mlLB液體培養基中進(jìn)行37℃振蕩過(guò)夜培養,培養基中加Ap100ul
。100ug/ml),質(zhì)粒pUC19具有Ap抗性基因,使得帶有pUC19的質(zhì)粒得以生長(cháng)。 過(guò)夜培養后菌體量大,雜質(zhì)較多,然后用移液槍吸取過(guò)夜培養物2ml轉接于50mlLB液體培養基中,培養基中加入Ap250ul,37℃振蕩培養4—6h至對數生長(cháng)期后期,生長(cháng)速率快,代謝旺盛,酶系活躍,雜質(zhì)少,適合提取質(zhì)粒。
3、質(zhì)粒提取
。1)稱(chēng)量空的50ml離心管的重量為14.331g,然后將三角瓶中的.菌液倒至管中,不能倒滿(mǎn),液面距管口約1cm,7000rpm離心5分鐘后棄去上清液,收集菌體細胞。
。2)向離心管中懸滴加入5ml冰預冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌,用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻,同步驟(1)離心,棄去上清,將離心管倒置于吸水紙上,使上清液全部流盡干燥,然后稱(chēng)重得14.437g,則菌體質(zhì)量為106mg。
。3)洗滌后每100mg菌體應加入冰預冷的溶液Ⅰ1ml,106mg菌體按100mg菌體處理,加入溶液Ⅰ1ml,打散菌泥、吹吸混勻,冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加,懸浮后的大腸桿菌不會(huì )快速沉積到管子的底部;維持滲透壓,防止細胞提前破裂,防止DNA受機械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價(jià)金屬離子的螯合劑,可抑制DNase的活性,抑制微生物的生長(cháng)。Tris—Cl溶液提供適當的pH。
。4) 按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml(與溶液Ⅰ對應),輕加輕搖,冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細胞膜發(fā)生了從bilayer(雙層膜)結構向micelle(微囊)結構的相變化導致細胞溶解。同時(shí),強堿性使染色體DNA、質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)變性;SDS為下一步沉淀做鋪墊。
。5)按比例加入冰預冷的溶液Ⅲ1.5ml(與溶液Ⅰ、Ⅱ對應),輕加輕搖,冰浴10min。溶液出現白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質(zhì)SDS復合物、細胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH,因為長(cháng)時(shí)間的堿性條件會(huì )打斷基因組DNA,只要是50-100 kb大小的片斷,就不能再被PDS共沉淀。同時(shí)變性的質(zhì)粒DNA復性。反應形成的高鹽環(huán)境進(jìn)一步加速了沉淀。
。6)12000rpm離心15min,白色沉淀聚集在離心管一側,用移液槍將上清液轉移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3MNaAc混勻,加入2倍體積的冰無(wú)水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會(huì )起任何化學(xué)反應,對DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩定存在,當加入乙醇時(shí),乙醇會(huì )奪去DNA周?chē)乃肿,使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中,DNA分子是帶負電荷的,加一定濃度的NaAc或NaCl,易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。
。7) 以12000rpm離心15min,小心倒去上清液,得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇,輕輕地覆蓋沉淀,不打散沉淀,洗滌一次。
。8)以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。去掉上清液,將離心管上沉淀部位做好標記,將離心管倒置于吸水紙上,干燥5min。粗提取的質(zhì)粒呈淺黃色,隨著(zhù)水分的減少質(zhì)粒變?yōu)闊o(wú)色。所以為了完全溶解質(zhì)粒,要在離心管上標記質(zhì)粒所在位置。
。9)將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中,移液槍吹吸助溶,然后將溶解液轉移到一個(gè)Eppendorf管中。TE是pH緩沖液,為DNA提供穩定的生理狀態(tài),呈弱堿性,有利于保護堿基對。同時(shí)含有EDTA是二價(jià)陽(yáng)離子的螯合劑,抑制DNA酶作用。
4、質(zhì)粒純化
。1)Eppendorf管中加入RNase A(純濃度>50ug/ml),37℃保溫0.5—1h
。2)將上述的溶液平均分配到2個(gè)1.5ml的微量離心管中,每管0.5ml,分別加入與溶液等體積的(500ul)Tris飽和苯酚溶液,振蕩混勻,7000rpm,離心5min,上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經(jīng)Tris飽和后的,顯黃色。苯酚加入后,溶液分層,苯酚向下,下層呈淺黃色,上層溶液無(wú)色,在中間產(chǎn)生大量白色沉淀,此為變性后的蛋白質(zhì)。
。3)加入等體積的(500ul)苯酚/氯仿溶液(1:1),振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強的蛋白變性劑,但是苯酚留在質(zhì)粒溶液中會(huì )影響DNA的酶切,它本身易被氧化,會(huì )損傷質(zhì)粒。氯仿也是蛋白變性劑,但是比酚弱,且能溶解質(zhì)粒中的脂類(lèi),溶解苯酚,去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過(guò)程中出現的泡沫,有利于分層更明顯。此時(shí)溶液中已看不到明顯的白色沉淀,但仍有蛋白質(zhì)的存在。
。4)加入等體積的氯仿溶液,振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中,得上清液400ul。
。5)向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻,再加入2倍體積的冰無(wú)水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。
。6)以12000rpm,離心15min,棄去上清液,得到DNA沉淀,為白色。
。7)向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul,不打散沉淀,洗滌。然后以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。
。8)去掉上清液,將離心管倒置于吸水紙上,室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。
5、質(zhì)粒檢測
。1)稱(chēng)取0.4g的瓊脂糖,置于一錐形瓶中,在三角瓶上標好液面位置,加入40ml的1×TAE電泳緩沖液,再加入5—10ml重蒸水,以補充在溶膠過(guò)程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化,溶液透明。冷卻至50℃左右,倒入制板槽制板。
。2)待膠凝固后,小心拔起梳子,使加樣孔端置陰極段放進(jìn)電泳槽內。在槽內加入1×TAE 電泳緩沖液,至液面覆蓋過(guò)膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質(zhì)粒樣品于小紙片上,用移液槍混勻。
。3)電泳1h,觀(guān)察溴酚蘭的帶(藍色)的移動(dòng)。
。4) 把膠槽取出,小心滑出膠塊,放進(jìn)EB溶液中進(jìn)行染色,完全浸泡約5min。
。5)凝膠成像儀觀(guān)察。
五、【注意事項】
。1)滴加溶液II時(shí),要逐滴加入,且要輕加輕搖溶液使之混勻,整體動(dòng)作要快,因為強堿在溶液中停留時(shí)間不能過(guò)長(cháng),否則會(huì )破壞質(zhì)粒DNA。
。2)加入溶液III后,生成了大量的絮狀沉淀,溶液III中和強堿使質(zhì)粒復性,不可劇烈震蕩, 防止染色體DNA斷裂,應該上下顛倒離心管,使其混勻。
生物實(shí)驗報告 15
一、實(shí)驗名稱(chēng):
用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞
二、實(shí)驗材料:
顯微鏡、洋蔥表皮細胞切片,及其他細胞裝片。
三、實(shí)驗步驟:
1、右手握住鏡臂,左手托住鏡座,把顯微鏡向著(zhù)光放在實(shí)驗臺上。
2、對光:轉動(dòng)轉換器,使低倍物鏡對準通光孔。
3、調節載物臺下的反光鏡,從目鏡往下看,能看見(jiàn)亮的光圈。
4、觀(guān)察:調節粗準焦螺旋,把所要觀(guān)察的洋蔥表皮切片放在載物臺上,用壓片夾夾住,標本要正對通光孔的中央。
5、左眼向目鏡內看,同時(shí)轉動(dòng)粗準焦螺旋等,直到看清切片上的.細胞為止,最后整理器材。
四、使用注意事項:
1、取送顯微鏡時(shí),應右手握住鏡臂,左手托住鏡座,輕拿輕放。
2、鏡檢時(shí),坐姿端正,一般用左眼觀(guān)察物象,用右眼看著(zhù)實(shí)驗報告紙畫(huà)圖。兩眼須同時(shí)睜開(kāi)。
3、切忌一面從目鏡進(jìn)行觀(guān)察,一面使鏡筒下降,這樣容易使物鏡與玻片標本碰撞而損壞。
4、在高倍鏡下調節焦距時(shí),切勿使用粗調節器,以免壓壞標本,損壞物鏡。
5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒,移開(kāi)鏡頭后再取出玻片標本,以免取玻片時(shí)擦損鏡頭的鏡面。
五、實(shí)驗原理:
利用教學(xué)顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。
六、創(chuàng )新點(diǎn):
在實(shí)驗過(guò)程中為學(xué)生提供多種細胞裝片,以供學(xué)生操作、觀(guān)察,增加了學(xué)生動(dòng)手實(shí)驗的時(shí)間,使學(xué)生在實(shí)驗中經(jīng)歷調節顯微鏡的焦距的過(guò)程,從而熟練掌握教學(xué)教學(xué)顯微鏡的使用方法。
生物實(shí)驗報告 16
一、課題的提出
創(chuàng )新時(shí)代賦予教育創(chuàng )新使命,綜合高考要求呼喚綜合創(chuàng )新能力培養。深化素質(zhì)教育改革,加強綜合創(chuàng )新能力培養是對數干年的“應試+科舉”式的傳統教育模式的拼棄。盡管經(jīng)過(guò)了現代化教育思想和理論的說(shuō)孔,但仍存在部分教師教學(xué)觀(guān)念和方法比較陳舊,尤其是創(chuàng )新意識創(chuàng )新實(shí)踐在教學(xué)中使用缺乏足夠的認識。古今中外的教育家創(chuàng )立了不少有效的教學(xué)方法,為我們借鑒應用,提供了充分的條件。我們在運用教學(xué)方法時(shí),做到內容與形式的統一,根據教材不同性質(zhì)的內容和學(xué)生的實(shí)際情況,運用不同的教學(xué)方法,挖掘教材中創(chuàng )新的教育資源,加強創(chuàng )新教育研究,使教學(xué)方法具有靈活性、多樣性和創(chuàng )造性。
二、課題的實(shí)驗目標
1、明確實(shí)現高中生物課程目標:養成實(shí)事法語(yǔ)是的科學(xué)態(tài)度,養成勇于探索不斷創(chuàng )新的精神與合作精神。發(fā)展比較、判斷、推理、分析、綜合等思維能力,初步形成創(chuàng )造性思維品質(zhì)和創(chuàng )新意識,能夠運用學(xué)到的生物學(xué)知識評價(jià)和解決某些實(shí)驗問(wèn)題。
2、確立高中生物綜合創(chuàng )新教育模式。
3、通過(guò)實(shí)驗研究,全組教師樹(shù)立正確的教育思想,加強學(xué)習,不斷進(jìn)行知識創(chuàng )新,能力創(chuàng )新,勇于探索,能利用各種現代化教學(xué)手段和現有實(shí)驗條件進(jìn)行綜合創(chuàng )新,教育研究,全面提高業(yè)務(wù)素質(zhì)和教學(xué)效果。
三、實(shí)驗過(guò)程
、鍖(shí)驗對象
我們采用隨機抽樣方法,選取成績(jì)一般的兩個(gè)班作為實(shí)驗班級。
、鎸(shí)驗內容:
1、采用生動(dòng)活潑,靈活多樣的教學(xué)手段和教學(xué)方法,引導學(xué)生自主學(xué)習,自主探索,誘發(fā)學(xué)生對生物學(xué)的興趣和求異創(chuàng )新的思維火花,逐步形成一套適合高中生心理和思維特點(diǎn)的新的教學(xué)模式。
2、開(kāi)展STS教育實(shí)驗。針對高考改革的要求,聯(lián)合社會(huì )發(fā)展,熱點(diǎn)問(wèn)題及生產(chǎn)生活實(shí)際,讓學(xué)生了解關(guān)心社會(huì )發(fā)展與科技進(jìn)步,激發(fā)創(chuàng )新欲望。用談話(huà)法、討論法、實(shí)驗法及分析兩部大開(kāi)發(fā),環(huán)境污染、疾病與健康等熱點(diǎn)問(wèn)題,提高學(xué)生創(chuàng )造性地解決問(wèn)題的能力。
3、高二生物課將研究性學(xué)習作為教材改革的主要內容之一。充分利用現有實(shí)驗器材與設備,校園中生物基地,培養學(xué)生合作學(xué)習、合作研究的精神,使學(xué)生得到實(shí)踐鍛煉的機會(huì )和直接的創(chuàng )新體驗,增強創(chuàng )新意識,培養創(chuàng )新情感,提高創(chuàng )新能力。
4、高三生物復習中主要是加強綜合問(wèn)題的研究,注意知識的滲透融合,是實(shí)現知識綜合化、系統化、網(wǎng)絡(luò )化,培養綜合創(chuàng )新能力的有效手段。
、鐚(shí)驗方法
本課題的研究采用以實(shí)驗研究為主的方法,輔之以經(jīng)驗總結法、文獻法和調查分析法,同時(shí)注意了資料的積累與分析,總結出研究報告一份,成果有論文、總結及創(chuàng )新教育實(shí)便資料多件。
、鑼(shí)驗步驟
1、準備階段:我們首先注意優(yōu)化課堂教學(xué)結構,突出實(shí)驗創(chuàng )新內容的安排。確定試點(diǎn)班級與實(shí)驗教師,擬定實(shí)驗方案,形成初其數據資料。為實(shí)驗順利進(jìn)行提供良好物質(zhì)基礎。
2、實(shí)施階段:收集整理資料,加強理論學(xué)習,通過(guò)不同途徑指導學(xué)生創(chuàng )新實(shí)踐。
、艑(shí)施實(shí)驗變量和控制無(wú)關(guān)變量。其中自變量:科學(xué)合理地指導學(xué)生的創(chuàng )新實(shí)踐活動(dòng),固變量:提高學(xué)生學(xué)習興趣和操作技能,全面提高學(xué)生創(chuàng )造性地解決問(wèn)題的創(chuàng )新思維和創(chuàng )新能力。教師、學(xué)生、教學(xué)條件既是實(shí)驗研究的自變量和固變量,也是影響實(shí)驗效果的相關(guān)變量,在實(shí)驗中,不斷排除不列于實(shí)驗研究開(kāi)展和影響實(shí)驗信度的干擾因素,由教師在實(shí)驗班中施行實(shí)驗內容,作用于實(shí)驗對象。
、茰y試。在每節實(shí)驗課里,對課堂教學(xué)效果進(jìn)行跟蹤測試。
、儆^(guān)察:由實(shí)驗教師對學(xué)生的課堂行為進(jìn)行觀(guān)察記錄、統計。主要觀(guān)察學(xué)生對教學(xué)內容是否感興趣。
、跍y量:包括達標測試,課前安排好內容,操作熟練者為達標。
在實(shí)施階段,教師邊實(shí)驗、邊學(xué)習、邊研究、邊小結,每?jì)芍芘e行一節觀(guān)摩課,積累典型課例,豐富創(chuàng )新教育素材。
3、總結階段
按實(shí)驗方案進(jìn)行總結、整理資料,統計分析數據,匯編成果目錄、積累成功實(shí)踐的素材,為進(jìn)一步擴大實(shí)驗研究成果,更好地開(kāi)展創(chuàng )新實(shí)踐做好物質(zhì)準備。
四、實(shí)驗成果
、鍢嫿烁咧猩飳(shí)驗教學(xué)與研究性學(xué)習自學(xué)輔導模式:
在原有的課堂教學(xué)中,一貫是教師講,學(xué)生聽(tīng),實(shí)驗課上教師講,學(xué)生做。在課堂上學(xué)生始終處于被動(dòng)地位,喪失了探索、求知的學(xué)習主動(dòng)性。沒(méi)有做過(guò)的實(shí)驗學(xué)生就束手無(wú)策,研究性學(xué)習更是無(wú)從下手,不會(huì )設計。為此,我們提出在教學(xué)基礎知識訓練基本技能時(shí)注重啟發(fā)誘導學(xué)生自我探索,自行學(xué)習,最后形成新技能這一自學(xué)輔導模式。培養了學(xué)生自我學(xué)習的能力和對生物不斷探索的強烈欲望。
教學(xué)模式可根據具體研究的內容與主題,所采取的研究手段等構建。如“酸雨對植物的`影”一課采用創(chuàng )設情景提出問(wèn)題小組討論實(shí)地觀(guān)測數據分析反饋應用的模式;“植物對水分的吸收”一課采用確定目標提出假設實(shí)驗研究結果分析歸納總結的模式。構建教學(xué)模式必須注意以下幾個(gè)要素;
、賹W(xué)生主體性的體現要充分;
、诮處煹闹笇ё饔靡鞔_;
、蹖W(xué)生研究的層次要分明;
、芤欣谂囵B學(xué)生的創(chuàng )新精神和團隊合作精神。
探究式教學(xué)模式的一般操作框架如圖:
、婕ぐl(fā)了學(xué)生的求知欲望,提高了學(xué)生的探究能力
實(shí)驗班學(xué)生通過(guò)一年多的探究實(shí)踐,對實(shí)驗與研究性學(xué)習內容有了強烈的興趣,教育生活化,生活課題化,學(xué)生從生活和社會(huì )實(shí)踐中尋找研究性學(xué)習的材料。如《校園植物資源調查》、《校園生態(tài)綠化方案設計》、《家用洗衣粉與河水污染》、《酸雨的危害調查》等。在施教過(guò)程中,綜合了各學(xué)科知識,利用校園網(wǎng)和校內外的現有資源培養學(xué)生的創(chuàng )新精神和實(shí)踐能力。不同學(xué)生對同一課題設計方案比較分析中,優(yōu)化探究方法是開(kāi)發(fā)學(xué)生思維空間的好辦法,探究活動(dòng)中給予學(xué)生充分的活動(dòng)空間和表現空間,為學(xué)生創(chuàng )新意識的激發(fā)及創(chuàng )新能力的培養提供必要的保障,為優(yōu)化師生關(guān)系,實(shí)施創(chuàng )新教育落實(shí)素質(zhì)教育,邁出堅實(shí)的步伐,在省生物學(xué)奧林匹克競賽中有2人獲省級獎,6人獲市級獎勵,高二生物實(shí)驗操作考試通過(guò)率100%,成績(jì)在同類(lèi)學(xué)校中名列前茅。
、缃處煹臉I(yè)務(wù)能力有了一定提高
通過(guò)實(shí)驗和總結,我們取得了一些開(kāi)展研究性學(xué)習和指導學(xué)生探究實(shí)踐的經(jīng)驗和方法,實(shí)驗教師提高了業(yè)務(wù)能力豐富了教育思想,我們的教研課多次受到了市縣教研室領(lǐng)導及兄弟學(xué)校同仁的好評。使我校生物教學(xué)邁上了一個(gè)新的臺階。已發(fā)表論文5篇,校級交流刊出多篇,在20xx~20xx學(xué)年度高三生物三次市統考中,我校生物均分在全縣完中分別列第二名、第二名、第一名。呈現穩步上升態(tài)勢。三位教師在市專(zhuān)業(yè)技能比賽中獲獎。
五、課題研究的成效與思考
1、利用現有校內外資源條件,結合教材中的有關(guān)內容,拓展學(xué)生思維空間,進(jìn)行實(shí)驗探究活動(dòng),對學(xué)生個(gè)性的張揚具有獨特價(jià)值;對于培養學(xué)生探究意識和終身學(xué)習能力,為學(xué)生個(gè)性的發(fā)展提供廣闊的空間是切實(shí)可行的,也是行之有效的。
2、課題的研究主要是專(zhuān)題性研究,為我們采用開(kāi)放式,滾動(dòng)式管理模式開(kāi)發(fā)校本課程,開(kāi)展更富有創(chuàng )造性的探索,最大限度地發(fā)揮學(xué)生的主動(dòng)性提供了可資借鑒的經(jīng)驗。
3、受人力限制,教師課時(shí)多,對于學(xué)生個(gè)別輔導,全面提高方面還有一定的發(fā)展空間,有待于我們把研究成果進(jìn)一步推向深入。
生物實(shí)驗報告 17
實(shí)驗三:
觀(guān)察人體口腔上皮細胞
目的要求:
1、制作和觀(guān)察人體口腔上皮細胞的臨時(shí)裝片
2、認識人體口腔上皮細胞的結構
3、熟練畫(huà)細胞結構圖
材料用具:
顯微鏡、吸水紙、載玻片、蓋玻片、生理鹽水、碘液、鑷子、紗布、漱口杯、牙簽
方法步驟
。ㄒ唬┲谱魅丝谇簧掀ぜ毎呐R時(shí)裝片
1、用紗布擦凈載玻片、蓋玻片(很薄,應輕擦)
2、在載玻片中央滴一滴生理鹽水(0.9%),說(shuō)明:為什么用0.9%的生理鹽水,觀(guān)察洋蔥表皮裝片用清水,都是為了讓細胞所處的環(huán)境和它們所生活的環(huán)境相同,不至于脹破或變形,使細胞保持原狀。
3、漱凈口。目的:將口腔的飯粒清除,以保證所取的.細胞純度。
4、用牙簽在口腔內壁輕劃幾下,將上面附有碎屑涂抹在生理鹽水中,盡量涂均勻。
5、蓋蓋玻片。用鑷子夾起蓋玻片,使它的一側先接觸載玻片的水滴,然后慢慢放平(注意:避免產(chǎn)生氣泡)。
6、染色。
、僭谏w玻片一側滴加稀碘液,
、谟梦堅谏w玻片另一側吸引,使染液浸潤標本的全部。
。ǘ┯蔑@微鏡觀(guān)察。
使用顯微鏡
、侔卜
、趯
、鄯胖貌F瑯吮,調節焦距,用眼觀(guān)察,在視野中會(huì )看到被染成桔黃色的上皮細胞、
。ㄈ├L圖:
人體口腔上皮細胞模式圖
。ㄋ模┱恚呵鍧嵅F,廢物放在指定位置。
歸納討論:人的口腔上皮細胞有哪些基本結構,植物細胞和動(dòng)物細胞相同和不同之處。答:人的口腔上皮細胞的基本結構有細胞膜、細胞質(zhì)和細胞核;植物細胞與動(dòng)物細胞相比,細胞壁、葉綠體和液泡是植物細胞特有的。
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