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大學(xué)生物實(shí)驗報告

時(shí)間:2020-10-11 11:57:27 報告 我要投稿

大學(xué)生物實(shí)驗報告三篇

  篇一:浙江大學(xué)生物傳感器實(shí)驗報告

大學(xué)生物實(shí)驗報告三篇

  實(shí) 驗 報 告

  生物傳感器 與測試技術(shù)

  課程名稱(chēng) 生物傳感器與測試技術(shù) 姓 名 徐夢(mèng)浙學(xué) 號 專(zhuān) 業(yè) 生物系統工程指導老師 王建平/葉尊忠

  一 熱電偶傳感器實(shí)驗

  一、 實(shí)驗目的:

  了解熱電偶測量溫度的原理和調理電路,熟悉調理電路工作方式。

  二、 實(shí)驗內容:

  本實(shí)驗主要學(xué)習以下幾方面的內容 1. 了解熱電偶特性曲線(xiàn);

  2.觀(guān)察采集到的熱信號的實(shí)時(shí)變化情況。 3. 熟悉熱電偶類(lèi)傳感器調理電路。

  三、 實(shí)驗儀器、設備和材料:

  所需儀器

  四、

  myDAQ、myboard、nextsense01熱電偶實(shí)驗模塊、萬(wàn)用表

  注意事項

  五、 在插拔實(shí)驗模塊時(shí),盡量做到垂直插拔,避免因為插拔不當而引起的接插件插針彎

  曲,影響模塊使用。 六、 禁止彎折實(shí)驗模塊表面插針,防止焊錫脫落而影響使用。 七、 更換模塊或插槽前應關(guān)閉平臺電源。 八、 開(kāi)始實(shí)驗前,認真檢查熱電偶的連接,避免連接錯誤而導致的輸出電壓超量程,否

  則會(huì )損壞數據采集卡。 九、 本實(shí)驗儀采用的電偶為K型熱電偶和J型熱電偶。

  十、 實(shí)驗原理:

  熱電偶是一種半導體感溫元件,它是利用半導體的電阻值隨溫度變化而顯著(zhù)變化的特性實(shí)現測溫。

  熱電偶傳感器的工作原理

  熱電偶是一種使用最多的溫度傳感器,它的原理是基于1821年發(fā)現的塞貝克效應,即兩種不同的導體或半導體A或B組成一個(gè)回路,其兩端相互連接,只要兩節點(diǎn)處的溫度不同,一端溫度為T(mén),另一端溫度為T(mén)0,則回路中就有電流產(chǎn)生,見(jiàn)圖50-1(a),即回路中存在電動(dòng)勢,該電動(dòng)勢被稱(chēng)為熱電勢。

  圖50-1(a) 圖50-1(b)兩種不同導體或半導體的組合被稱(chēng)為熱電偶。

  當回路斷開(kāi)時(shí),在斷開(kāi)處a,b之間便有一電動(dòng)勢ET,其極性和量值與回路中的熱電勢一致,見(jiàn)圖50-1(b),并規定在冷端,當電流由A流向B時(shí),稱(chēng)A為正極,B為負極。實(shí)驗表明,當ET較小時(shí),熱電勢ET與溫度差(T-T0)成正比

  十一、 實(shí)驗步驟:

  十二、 關(guān)閉平臺電源(myboard),插上熱電偶實(shí)驗模塊。開(kāi)啟平臺電源,此時(shí)可以看到

  模塊左上角電源指示燈亮。

  十三、 打開(kāi)nextpad,運行熱電偶實(shí)驗應用程序

  十四、 查看傳感器介紹,了解熱電偶的原理及溫差與熱電勢之間的關(guān)系。

  十五、 在特性曲線(xiàn)頁(yè)面。選擇不同型號的熱電偶觀(guān)察各型號熱電偶的V-T,在測溫曲線(xiàn)的

  下方,手動(dòng)模擬產(chǎn)生熱電勢的值,觀(guān)察測溫曲線(xiàn)。

  十六、 在實(shí)驗內容頁(yè)面中了解實(shí)驗的內容、操作方式和過(guò)程

  十七、 在仿真頁(yè)面任意改變運算放大器的輸出電壓值和運算放大倍數,記錄E(T,T0)和

  冷端溫度仿真的輸出值E(T0),將數據填寫(xiě)到熱電偶溫度手動(dòng)測量表中,查表計算熱電偶的電勢所對應的溫度值。 十八、 在測量頁(yè)面

  十九、 選擇實(shí)際接入的電阻

  二十、 在nextsense01中,用杜邦線(xiàn)將R2 R4鏈接到運算放大器上。

  二十一、 調零。將A、B端用杜邦線(xiàn)短接,調節模塊右側下方的電位器,對放大器的輸

  出Vout進(jìn)行調零。 二十二、 測量。選擇K型或者J型熱電偶其中一個(gè),連接到A、B兩端,在自動(dòng)測量頁(yè)

  面,點(diǎn)擊頁(yè)面上的開(kāi)始按鈕進(jìn)行數據的采集和記錄,將熱電偶放置到熱水中記錄溫度的變化(溫度變化范圍至少30度)。 二十三、 在nextpad頁(yè)面中,點(diǎn)擊頁(yè)面右上的數據保存按鈕,選擇保存的表格,進(jìn)行數

  據的保存。

  二十四、 數據及結論(繪制數據點(diǎn)散圖,建立回歸方程,分析靈敏度和線(xiàn)性誤差)

  冷場(chǎng)溫度 熱電偶輸出電勢(uV) 20.64 3543.21 20.65 3500.6 20.65 3731.66 20.65 3730.34 20.64 3797.56

  測量點(diǎn)溫度

  87.59 86.81 91.08 91.06 92.3

  溫度差 66.95 66.16 70.43 70.41 71.66

  20.64 20.65 20.65 20.65 20.64 20.65 20.65 20.66 20.66 20.65 20.66 20.65 20.66 20.64 20.66 3815.1 3561.15 3491.3 3509.37 3463.48 3472.74 3514.91 3535.65 3585.15 3601.62 3544.6 3443.76 3421.89 3410.39 3461.66 92.62 87.93 86.63 86.97 86.11 86.29 87.07 87.46 88.38 88.68 87.63 85.76 85.36 85.13 86.1

  71.98 67.28 65.98 66.32 65.47 65.64 66.42 66.8 67.72 68.03 66.97 65.11 64.7 64.49 65.44

  結論:

  實(shí)驗表明,當ET較小時(shí),熱電勢ET與溫度差(T-T0)成正比,被測傳感器的比例系數為54.020。根據半導體的電阻值隨溫度變化而顯著(zhù)且有規律變化的這一特性,可以實(shí)現測溫功能。

  篇二:大學(xué)生物實(shí)驗論文要領(lǐng)

  白色背景

  題目:用短語(yǔ),不用句子:……的研究,不要用學(xué)科題目作標題;英文:A study of…… 通訊作者:BOSS,支持者

  摘要:目的、方法、結果、結論。不宜舉例,不用引文。英文摘要調整一下,符合英文順序。關(guān)鍵詞:分子式、化學(xué)式不作為關(guān)鍵詞,要寫(xiě)全名。常規技術(shù)不做關(guān)鍵詞如離心,英文關(guān)鍵詞用,隔開(kāi)

  前言:常見(jiàn)的引言包括以下內容:

  1 提出課題的現實(shí)情況和背景;

  2說(shuō)明課題的性質(zhì)、范疇及其重要性,突出研究的目的或者需要解決的問(wèn)題;

  3 前人研究成果及其評價(jià);

  4 達到研究目的的研究方法和實(shí)(試)驗設備;

  5 研究工作的新發(fā)現。

  研究背景理論依據(XX是什么,研究進(jìn)展,實(shí)驗原理包括方法原理、實(shí)驗對象原理即為什么選這兩個(gè)對象,有無(wú)關(guān)聯(lián),判斷原理的依據)、研究目的(要解決什么問(wèn)題)、研究方法(怎樣研究)400-500字左右,文獻綜述包括在前言里。

  寫(xiě)前人……本研究……希望得到……的結果

  材料:寫(xiě)主要的,例如樹(shù)脂,Tris,其他就寫(xiě)國產(chǎn)分析純,如NaCl,燒杯、試管不寫(xiě)

  方法:眾所周知的方法不寫(xiě),如離心。寫(xiě)出方法名字,注明參考文獻,重點(diǎn)寫(xiě)改進(jìn)方法。例如:提取效果為……的電泳進(jìn)行檢測

  結果:比例尺、圖標、放大倍數;不進(jìn)行評論評價(jià)分析討論,實(shí)驗結果不要原始濃度,電泳的各個(gè)泳道是什么一定要寫(xiě)出來(lái)。洗脫圖自己重新做一個(gè),標注單位。柱層析的峰要寫(xiě)標號,注明是什么蛋白。

  結論:實(shí)驗表面結果,反映了什么現象。相同因素之間,不同因素之間。方法怎么樣。 討論:得到這樣結果的可能原因,原因大小程度。建議、改進(jìn)可放分析討論。1討論為什么會(huì )出現這樣的結果出現意味了什么?用理論解釋。2比較與前人異同(異:解釋差異;同:更加證明)3研究有什么新發(fā)現,可能的原因4實(shí)驗的不足

  其他:同一結果圖表不共存,如果圖不能直接說(shuō)明可以附上表,圖上無(wú)多余的線(xiàn),違反總體趨勢的個(gè)別點(diǎn)可以去掉。折線(xiàn)圖橫軸按實(shí)驗進(jìn)行順序編寫(xiě)。小數點(diǎn)位數保持一致。 (適用于細胞生物學(xué)及植物生理學(xué))

  微生物及生物化學(xué)有待補充。。。

  致謝:協(xié)助、資金支持,200字

  生化海報:IgG與別人標準進(jìn)行比較,pro標準曲線(xiàn)不過(guò)0點(diǎn),標準pro只有280nm,幾個(gè)樣都要算。

  圖名稱(chēng)包括:方法、目的、對象

  電泳:上樣順序、其他分子量、marker分子量、分析趨勢(遷移率一般達不到0.999) 紫外:峰1,峰2,那個(gè)是我們的

  寫(xiě)分析不寫(xiě)說(shuō)明,與其他步驟聯(lián)系起來(lái),層析與電泳聯(lián)系起來(lái)說(shuō)明

  分析:最后有結論,濃度、回收率提取出來(lái),圖有序列關(guān)系,按實(shí)驗進(jìn)行順序

  海報一般是豎的,存PDF或圖片

  分析討論對結果討論,對別人展示好的一面,不是注意事項

  要有說(shuō)明,表名稱(chēng),要有整體聯(lián)系性。

  篇三:大連理工大學(xué) 生化實(shí)驗報告——模版(新)

  小牛腸堿性磷酸酶的提取及酶活測定、

  考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)含量、

  SDS-PAGE電泳法測定蛋

  摘要 本實(shí)驗通過(guò)從小牛腸中提取小牛腸堿性磷酸酶,利用考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)含量,并測定酶的活性。最后通過(guò)SDS-聚丙烯凝膠電泳測定蛋白質(zhì)相對分子量.

  關(guān)鍵詞 小牛腸堿性磷酸酶提取 酶活測定 考馬斯亮藍法 SDS-PAGE電泳法

  本實(shí)驗分為三部分。先通過(guò)對牛小腸內膜的刮取,離心,沉淀析出等方法,提取牛小腸堿性磷酸酶;然后用考馬斯亮藍G-250與堿性磷酸酶結合,利用紫外分光光度計在一定波長(cháng)下測定結合物的吸收波長(cháng),根據其吸光度與蛋白質(zhì)結合物的含量成正比的關(guān)系測定蛋白質(zhì)含量,進(jìn)而測定出蛋白質(zhì)的比活力;最后,通過(guò)SDS-聚丙烯凝膠電泳測定蛋白質(zhì)相對分子量,分析所獲得的電泳結果來(lái)推算出被測蛋白質(zhì)分子量的近似值。

  1 實(shí)驗部分

  1.1 試劑與儀器

  1.1.1小牛腸堿性磷酸酶的提純及酶活測定

  1、 試劑

 。1)正丁醇、丙酮(置-20℃冰箱保存)

 。2)1mol/L醋酸(HAC)、1mol/LNaOH、硫酸銨

 。3)平衡緩沖液:0.01mol/LTris-HCL,PH 8.0,(含1.0×10-3mol/LMgCl2和1.0×10-5mol/LZnCl2)。

 。4)底物緩沖液:1mol/L二乙醇胺-鹽酸緩沖液(PH9.8,含0.5×10-3mol/LMgCl2)。

 。5)酶的底物溶液:用底物緩沖液配制15×10-3mol/L對硝基苯磷酸二鈉溶液。(已加入底物緩沖液中)

  2、儀器

  勻漿機、冷凍離心機、恒溫水浴、紫外可見(jiàn)分光光度計、離心管、剪刀、載玻片、不銹鋼盤(pán)、搪瓷盤(pán)、濾布、漏斗、分液漏斗、量筒、燒杯、移液槍、比色皿

  1.1.2考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)含量

  1、試劑

  考馬斯亮藍、實(shí)驗小牛腸堿性磷酸酶的提純及酶活測定所得酶液、生理鹽水

  2、儀器

  分光光度計、分析天平、玻璃比色杯、試管及試管架、移液槍

  1.1.3 SDS-PAGE電泳法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量

  1、試劑

  1)30%丙烯酰胺(acrylamide,Acr)置棕色瓶。

  2)分離膠緩沖液:1.5mol/LTris-HCL緩沖液,pH8.8,已加入10%SDS。

  3)濃縮膠緩沖液:0.5mol/LTris-HCL緩沖液,pH6.8,已加入10%SDS。

  4)10%過(guò)硫酸銨(AP)(小離心管裝,提供驅動(dòng)丙烯酰胺和雙丙烯酰胺的聚合所必須的自由基,須新鮮配置。)

  5)TEMED(四甲基乙二胺)(小離心管裝T,通過(guò)催化過(guò)硫酸銨形成自由基而加速丙烯酰胺和雙丙烯酰胺的聚合)

  6)上揚緩沖液(小離心管裝S):稱(chēng)100mgSDS、2mg溴酚藍、2g甘油,加0.1mL巰基乙醇、2mL-。-5mol/LpH8.0Tris-HCL,加超純水定容至10mL。

  7)染色液:配置含0.1%考馬斯亮藍R250,40%(體積分數)甲醇和10%(體積分數)冰醋酸的染色液500mL,過(guò)濾后備用。

  8)脫色液:500mL10%(體積分數)甲醇和10%(體積分數)冰醋酸的脫色液1000mL。

  9)電泳緩沖液(含0.1%SDS,0.05mol/LTris,0.384mol/L甘氨酸pH8.3).

  2、儀器

  電泳儀、電泳槽、制膠板、搖床、移液槍

  1.2 實(shí)驗過(guò)程

  1.2.1小牛腸堿性磷酸酶的提純及酶活測定

  1、酶的`分離提純

  1)取新鮮小牛腸,用剪刀縱向剖開(kāi),用載玻片刮去小腸內粘膜,放到盤(pán)子一角。

  2)統一將小腸黏膜液集中倒入勻漿機中,加1.5倍體積冰冷蒸餾水,高速勻漿15s,重復20次。

  3)緩慢加入(總體積)1倍體積的冰冷正丁醇,高速勻漿15s,重復20次。

  每組領(lǐng)取60mL的勻漿液,放入離心管中(離心管裝液量不能超過(guò)70%),用另一離心管用水配平(切記離心前連同離心管蓋子一起用天平配平),在4℃條件下,10000rpm,離心15min(離心管對稱(chēng)放置)。

  4)用濾布過(guò)濾去除雜質(zhì)(濾餅),倒入分液漏斗中,靜止分層(勿搖),去下層水相,用1mol/LHAc調pH到

  4.9。4℃,10000rpm,離心10min。

  5)得到上清26.5mL,放入離心管中,用1mol/LNaOH調pH至6.5,稱(chēng)取質(zhì)量為溶液體積5%的硫酸銨1.33g(5g硫酸銨/100mL溶液),加到離心管中溶解;再加0.47倍體積(12.45mL)冰冷丙酮,混勻,4℃(冰箱中)靜置30min以上。4℃,10000rpm,離心10min。

  6)上清液36.5mL中加入1.07倍體積(39.06mL)冰冷丙酮,4℃靜置30min以上。4℃,10000rpm,離心10min。

  7)取沉淀溶于2mL平衡緩沖液至全部溶解。置冰箱保存待用。

  2、底物處理

  底物(對硝基苯磷酸二鈉已溶于平衡緩沖液中)37℃水浴5min(注意:根據分光光度計使用情況,要檢測前加熱)

  3、酶活檢測

  1)將酶稀釋10倍(配制取10μL,溶于90μL平衡緩沖液中得到)

  2)紫外分光光度計檢測條件:405nm波長(cháng),測定時(shí)間60s,取值2s,記錄范圍0.0-1.5。

  3)取2個(gè)2mL比色皿(0.5cm光程),加入1.5mL上述(2)加熱的底物緩沖液,校對歸零。

  4)將稀釋10倍的酶液10μL加到其中1個(gè)比色皿中(儀器外側),用手堵住皿口?焖偕舷碌2次,放回分光光度計中,測定沒(méi)動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)。

  1.2.2考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)含量

  1、玻璃試管中加入5mL考馬斯亮藍。

  2、在1.5mL離心管中,取上一實(shí)驗得到的酶液分別稀釋50、100、200倍。

  3、各取100μL加入到5mL考馬斯亮藍試管中,混勻,反應5min以上,另各取100μL生理鹽水分別加入到5mL考馬斯亮藍試管中。(觀(guān)察藍色,以淺藍色為好)

  4、紫外分光光度計檢測條件:595nm波長(cháng)

  5、取2個(gè)比色皿(1cm光程)加入考馬斯亮藍(比色皿的2/3),分光光度計中校對歸零。

  6、將樣品放入外側比色皿中,讀吸光值(得到醫治蛋白濃度標準曲線(xiàn)范圍內的度數即可,0.1-0.5之間)。

  7、根據蛋白濃度標準曲線(xiàn),計算酶蛋白濃度(乘以相應稀釋倍數即得原始酶液蛋白濃度,注意單位)

  1.2.3 SDS-PAGE電泳法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量

  1、裝板:將垂直板型電泳的玻璃片洗凈、晾干;放好膠條(棱朝上,平鋪),用夾子夾好玻璃板,上面插上梳子(注意下面2個(gè)夾子要水平,兩側夾子離梳子底部1-0.5cm,表明分離膠加的位置),垂直放置在水平臺面上

  備用。

  2、制備分離膠:在小燒杯中按下表配置所需濃度的分離膠。

  分離膠制備(濃度10%,制備量10mL)

  試劑

  H2O 30%丙烯酰胺

  1.5mol/LTris-HCL緩沖液pH8.8

  10%過(guò)硫酸銨

  TEMED 用量 4.1mL 3.4mL 2.4mL 100μL 10μL

  注意:最后加入TEMED,應快速搖勻分離膠,向玻璃板間隙,沿著(zhù)長(cháng)玻璃板的內側緩慢注膠,然后再用移液槍慢慢移動(dòng)注入乙醇200μL,以防止氧氣進(jìn)入膠內。15min后,分離膠和乙醇之間出現分界線(xiàn),表明分離膠凝固,倒出乙醇。

  3、制備凝縮膠:在小燒杯中按下表配置所需濃度的濃縮膠。

  濃縮膠制備(濃度5%,制備量6mL)

  試劑

  H2O 30%丙烯酰胺

  0.5mol/LTris-HCL緩沖液pH6.8

  10%過(guò)硫酸銨

  TEMED

  進(jìn)入氣泡,放置約20min,待濃縮膠凝固。

  4、蛋白質(zhì)樣品處理(小離心管裝B):在1.5mL離心管中按1:1體積比例,加樣品和上樣緩沖液(200μL:200μL)。100℃加熱3min使蛋白變性。

  5、濃縮膠完全聚合后,去掉夾子和膠條,拔去梳子(注意不要產(chǎn)生氣魄,即電泳泳道),將凝膠玻璃板固定于電泳裝置內槽上,加入電泳緩沖液(內、外槽,查漏),緩沖液高過(guò)玻璃板凹面。

  6、用移液槍依次在泳道加樣(5個(gè)20μL,4個(gè)40μL)。(本組將marker置于第六泳道)

  7、電泳:連接正、負極,打開(kāi)電源(穩壓130V或電流50-60mA),開(kāi)始時(shí),電流控制在40A,樣品進(jìn)入分離膠后,緩慢升高電壓至140V或電流50-60mA保持電壓或電流強度不變。帶溴酚蘭指示劑遷移至下沿處,停止電泳,需1.5h左右。

  8、剝膠染色:電泳結束后,取出凝膠玻璃板,用水沖洗,用金屬片從玻璃兩側輕輕撬開(kāi)。使板內進(jìn)入空氣,同時(shí)用水沖洗,取出凝膠板,將剝離下來(lái)的凝膠用水漂洗,轉入染色缸中。加染色液,至搖床染色15min。

  9、脫色:染色完畢,回收染色液,用水漂洗,加入脫色液,置搖床脫色,30min換1次脫色液,脫色至背景清晰。

  10、觀(guān)察測定蛋白的遷移率及條帶,對照標準樣品,分析蛋白樣品的分子量及純度。

  11、拍照電泳結果,用于完成實(shí)驗報告。

  用量 3.4mL 1.0mL 1.5mL 60μL 8μL 注意:一旦加入TEMED,應快速搖勻濃縮膠,在已凝固的分離膠層上加濃縮膠,立即將梳子插入膠液頂部,避免

  2 結果與討論

  2.1 小牛腸堿性磷酸酶的酶活測定

  堿性磷酸酶酶活定義:在37℃條件下,以每分鐘催化水解1μmol底物的酶量為一個(gè)酶活力單位。

  堿性磷酸酶作用于緩沖液中的對硝基苯磷酸二鈉,使之水稀釋放出對硝基苯酚,后者在405nm光波長(cháng)下有最大吸收,通過(guò)測定吸光值的變化率,可測知酚的生成量,從而計算出酶的活性單位。

  酶活力的計算:

  比活力(U/mg)= ΔA/min×VR×DE405×VE×C×L

  1、由實(shí)驗小牛腸堿性磷酸酶的提純及酶活測定中實(shí)驗步驟可知,

  反應液的體積VR= 1.5mL

  稀釋倍數 D= 10

  405nm波長(cháng)下對硝基苯酚的摩爾消光系數E405= 18.3L/(mol×cm)

  所加酶液體積VE= 0.01mL

  比色皿光程 L= 0.5cm

  2、405nm波長(cháng)下的吸光值的變化率通過(guò)分光光度計測量得到酶動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)(圖1)可以得到,ΔA/min=0.6179 (根據圖片,自己估算斜率,注意單位。)

  /看后刪除

  說(shuō)明: 圖片均要用自己的。

  半欄圖片寬為8.15厘米,高為4.4~5.5厘米之間,對于特別大的圖可加大寬度。通欄圖片寬度為16.3厘米,高為4.4~5.5厘米之間,圖說(shuō)為字號為小5號黑體字。

  /

  表注用小5號字,表字用6號字。

  圖1.酶動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)

  3、蛋白質(zhì)原始濃度C可由實(shí)驗考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)含量獲得

  考馬斯亮藍G-250測定蛋白質(zhì)含量屬于燃料結合法的一種。在一定蛋白濃度范圍內(0.01-1.0mg/mL),蛋白質(zhì)-色素結合物在

  595nm

  波長(cháng)下的光吸收與蛋白質(zhì)含量成正比,故可用于蛋白質(zhì)的定量測量。

  通過(guò)實(shí)驗,利用紫外分光光堆積測定稀釋50倍的酶液讀得吸光值為0.1478A,利用考馬斯亮藍常量法測蛋白質(zhì)標準曲線(xiàn)(圖2)及其標準曲線(xiàn)擬合解析式y=0.697x-0.007得稀釋后的標準蛋白濃度為0.2221mg/mL。

  故蛋白質(zhì)原始濃度C=50×0.2221mg/mL=11.105mg/mL

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